Amplificación de la región mitocondrial SSU-ARNt-LSU en Aylacostoma chloroticum (Gastropoda)

ZURRO, N.B.; VOGLER, R.E.; PESO, J.G.; ARGÜELLES, C.F.

Río Cuarto

Jornada; III Jornadas Nacionales de Estudiantes de Biología; 2009

Universidad Nacional de Río Cuarto

Los caracoles fluviátiles del género Aylacostoma Spix, 1827 representan a la familia Thiaridae en el Neotrópico. Estos gasterópodos vivíparos con reproducción pertenogenética son característicos de ambientes de agua dulce donde la corriente forma "correderas". Para la región del Alto Paraná (Argentina-Paraguay) se han descrito cuatro especies, de las cuales actualmente sólo es posible hallar, en la naturaleza, representantes de Aylacostoma chloroticum Hylton Scott, 1953, en dos poblaciones relictuales con riesgo de extinción. De acuerdo a revisiones taxonómicas recientes utilizando información proveniente del ADN mitocondrial, la familia de estos moluscos se encuentra incluida en la superfamilia Cerithioidea. El objetivo del presente trabajo consistió en obtener tres fragmentos mitocondriales a partir de la región denominada SSU-ARNt-LSU que permitan establecer, una vez conocidas sus secuencias, las relaciones filogenéticas de A. chloroticum con otros miembros de la superfamilia. Para el presente trabajo, se emplearon ejemplares de A. chloroticum provenientes de acuarios pertenecientes al programa Aylacostoma de la Universidad Nacional de Misiones. La extracción de tejidos, sin el sacrificio de los individuos, se realizó luego de una relajación de los mismos en solución de pentobarbital sódico al 0.20 %. La extracción de ADN genómico total se efectuó siguiendo el protocolo de CTAB. el rendimiento de las extracciones se verificó en gel de agarosa al 1 %. Los ensayos de amplificación mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) se realizaron según la descripción efectuada por Holznagel y Lydeard (2000) para la región de análisis. Se obtuvieron tres amplicones con un tamaño aproximado de 1100, 350 y 550 pb los que fueron verificados en geles de agarosa al 2 %. Del trabajo realizado se destaca que los cebadores empleados en los ensayos fueron específicos para los fragmentos de interés, resultando reproducibles los patrones obtenidos.