ESTUDIO LONGITUDINAL SOBRE TRASMISIÓN Y PERSISTENCIA DE E. COLI O157:H7 EN BOVINOS

LUIS RHADES; F. BABENIC; A CATALDI; LARZABAL M; BALDONE V; AMIGO N; URQUIZA L; GELID L; DELICIA M; FORT M

Jujuy

Congreso; Congreso AAVLD; 2016

ESTUDIO LONGITUDINAL SOBRE TRASMISIÓN Y PERSISTENCIA DE E. COLI O157:H7 EN BOVINOS L. C. Rhades 1; F. Babinec1; A. A. Cataldi 3; M. Larzabal 3; V. N. Baldone 1; N. Amigo 3; L. Urquiza 1; L. Gelid 1; P. J. Delicia 2; M. C. Fort 1;1) EEA INTA Anguil 2) UTN Facultad Regional Rosario 3) Instituto de Biotecnología INTA Castelar rhades.luis@inta.gob.ar INTRODUCCIÓNE. coli O157:H7 es una de las causantes del síndrome urémico hemolítico (SUH), como consecuencia de la producción de toxina Shiga (Stx) en el intestino, que actúa sobre los riñones, cerebro y otros órganos en el hombre.El SUH es una enfermedad endémica en Argentina, afectando a niños de entre 6 meses a 6 años de edad.Estudios realizados a campo, demostraron que el 20% de los bovinos estaban infectados con E. coli O157:H7. La dinámica de la transmisión entre los animales tiene implicancia en el riesgo de infección al ser humano; situación que adquiere relevancia epidemiológica, por mantener a la bacteria en el ambiente y favorecer su diseminación.El conocimiento de la dinámica de la excreción de E. coli es importante para contribuir a proyectar medidas para disminuir su prevalencia y minimizar el riesgo para la salud pública.MATERIALES Y METODOSSe utilizaron 120 terneros machos, recién destetados, de 4 y 6 meses de edad y entre 87 kg y 224 kg de peso y encerrados en 36 corrales, albergando entre 3 a 4 terneros por redil, distribuidos por peso, en dos bloques: livianos y pesados.Desde el 19 de marzo de 2014 hasta el 24 de abril de 2015, se tomaron muestras mensuales, mediante el Hisopado de la Mucosa Recto Anal (HMRA), a todos los animales.Los HMRA se incuban en caldo tripticasa soja (TSB), suplementado con vancomicina, cefixima y telurito de potasio, para la posterior separación inmunomagnética (SIM) de las cepas de E. coli. Luego de la SIM, se sembró la suspensión en Agar Mac Conkey Sorbitol + cefixima telurito + suplemento MUG (SMACCT) para seleccionar las colonias de E. coli O157:H7 que no fermentan el sorbitol y el MUG. Para confirmar el aislamiento de las colonias que no fermentaron al sorbitol y no metabolizaron al MUG, se las somete a la prueba de aglutinación con latex recubierto de-anticuerpos anti O157:H7 (Test de Latex).Las cepas de E. coli O157:H7 identificadas, se repicaron en medio Agar Mac Conkey y al finalizar la incubación, se acondicionaron para su almacenamiento y conservación a ?74ºC, hasta la posterior extracción de ADN, para la caracterización genética de las cepas.Se utilizó la reacción de PCR Multiplex para detectar los genes de la región constante de Intimina (eae), de las toxinas Shiga 1 y 2 (stx1 y stx2), y del responsable de la síntesis del antígeno O (rfbO157).RESULTADOSSetenta y tres de 120 (61,86 %) animales excretaron STEC, de ellos, 60 (82,19 %) una sola vez; 12 (16,44 %) dos veces y entre ellos, 2 lo hicieron en forma consecutiva. Solo 1 animal (1,37 %) excretó STEC en tres oportunidades.De los 13 terneros excretores de STEC en el primer muestreo, solo 1 excretó STEC en el último diagnóstico.De marzo hasta junio, con los terneros encerrados consumiendo dieta de recría, la excreción de STEC va disminuyendo de 13/120, 5/120, 4/120, 2/120 y 1/120.De julio a noviembre, pastorearon a campo, observándose un elevado número de animales excretores, 18/120 en setiembre y 18/120 en noviembre. A partir de diciembre vuelven a los corrales y la prevalencia baja a 5/120 en diciembre, 1/120 en enero y vuelve a elevarse a 6/120 en abril de 2015.La excreción de STEC es elevada en marzo, abril, setiembre, noviembre, diciembre 2014 y abril 2015.Se detectaron en todas las cepas aisladas(73) los genes de la región constante de Intimina (eae) y del responsable de la síntesis del antígeno O (rfbO157).Los animales que excretaron STEC al inicio, llevaban los genes de Stx1, Stx2 y Stx1 y 2, mientras los animales que excretaron STEC en el último HMRA, produjeron solamente Stx2 y Stx1 y 2. La producción de Stx1 se da solo en los primeros tres meses, representando el 11% de la producción total de Stx, mientras que el gen stx2 se detecta en 9 / 10 muestreos (33%) y Stx12 en 7 / 10 (56%), estas dos últimas con niveles variables de producción durante todo el periodo de ensayo.De 12 animales que excretaron STEC dos veces, 2 produjeron Stx1 y luego Stx1 y 2. Dos produjeron primero Stx2 y luego Stx1 y 2. Un animal consecutivamente Stx12 y luego Stx2. Dos produjeron Stx2 y 5 Stx12. Un animal, excretó STEC 3 veces; 2 consecutivamente Stx2 y una vez Stx12.Como conclusión podemos decir que la excreción de STEC varía a lo largo del año, con picos en marzo, abril, mayo (otoño); y más elevados en setiembre y noviembre (primavera) con pastoreo a campo y nuevamente un incremento en abril de 2015 (otoño). La producción de Stx es variable. Stx1 se detecta en terneros jóvenes y desaparece. La producción de Stx2 fue constante a los largo del ensayo. La producción de Stx12 es significativamente mayor en marzo y durante el pastoreo de setiembre y noviembre.BIBLIOGRAFIA1- Almada, J.; Estrella, P.; Ottavianoni, L.; Pérez, S.; Rodríguez, E.; Chinen, I.; Carbonari, C.; Deza, N.; Miliwebsky, E.; Baschbier, A.; Rivas, M. Relación clonal de E. coli O157 H7 aislada de un caso de SUH, un portador asintomático muestras de alimentos, La Pampa, Argentina, 2008. VTEC Asociación de Microbiología Argentina, Simpociio VTEC, Bs. As. 2009.2.- Sargeant, J. M.; Gillespie, J. R.; Oberst, R. D.; Phebus, R. K.; Hyatt, D. R.; Bohra, L.; Galland, J. C. Results of a longitudinal study of the prevalence of Escherichia coli O157 H7 on cow calf farm. AVMA. American Journal of Veterinary Reseach, Nov 2000, Vol 61, N° 11, pp 1375 ? 1379.3.- Vilte, D. A.; Larzábal, M.; Cataldi, A. A.; Mercado, E. C.; Bovine Colostrum Cantains Inmunoglobulin G Antibodies against Intimin, EspA, and ESPB and Inhibits Hemolytic Actibity Madiated by Type Three Secretion System of Attaching and Effacing Escherichia coli; Clinical and Vaccine Inmunology, Aug.2008; Vol. 15, Nº 8; p. 208-12134.- Soo Jin Jeon, Elso, M.; DiLorenzo, N.; Clif Lamb, G.; Kwang Cheol Jeong, Evaluation of Animal Genetic and Physiological Factors That Affect the Prevalence of Escherichia coli O157 in Cattle. Plos ? One February 2013, volume 8, issue 2 www.plosone.org