Puesta a punto de un modelo de colonización en bovinos por EHEC O157:H7.

VILTE DA; LARZÁBAL M,; DELGADO F; MEIKLE V; GARBACCIO S; CATALDI AA; MERCADO EC

Córdoba

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología; 2007

  El ganado bovino es el principal reservorio de Escherichia coli enterohemorrágico (EHEC) O157:H7, bacteria que en el ser humano causa el síndrome urémico hemolítico (SUH). Por lo tanto, la obtención de vacunas que eviten la colonización del ganado por EHEC O157:H7 sería una de las principales herramientas de un programa de control del SUH. Con el propósito de evaluar vacunas experimentales contra este patógeno en bovinos se ensayó un modelo de colonización intestinal en terneros de raza Holando-Argentino de 6 meses. Se seleccionaron animales no excretores de EHEC O157:H7 mediante enriquecimiento, separación inmunomagnética (SIM), aislamiento en agar MacConkey Sorbitol (SMAC) Cefixima Telurito y PCR de zona de confluencia a partir de hisopado recto-anal (HRA), y que presentaron títulos de IgG contra g Intimina y EspB de EHEC O157:H7 determinados por ELISA menores a 100. Se ensayaron dos cepas locales de E. coli O157:H7 aisladas de bovinos, seleccionándose una de ellas por su persistencia en heces luego de 15 días de inoculación. Para facilitar la identificación se obtuvo una mutante natural resistente a ácido nalidíxico (Nal R) de dicha cepa. La inoculación experimental se llevó a cabo en boxes de bioseguridad nivel II. Tres terneros recibieron 109 UFC de la cepa mediante sonda nasogástrica. Durante 22 días se determinó la excreción de la cepa mediante recuento a partir de materia fecal en SMAC-Telurito-Nalidíxico (SMAC-TN) y enriquecimiento, SIM y aislamiento de HRA. Al finalizar la experiencia se tomaron muestras de suero para seguimiento de IgG contra proteínas específicas de EHEC como g Intimina y EspB y se recolectaron diferentes segmentos del tubo intestinal para determinar la presencia de E. coli O157:H7 NalR. La excreción se prolongó durante 8-14 días dependiendo del animal, y llegó a un máximo de 2500 a 3500 ufc/g. Al momento de la necropsia, 22 días post-inoculación, no se detectaron colonias de E. coli O157:H7 NalR en ninguna de las muestras. En cuanto al nivel de IgG específicas se observó un ligero aunque no significativo aumento. Conclusiones: Se logró poner a punto un modelo de infección experimental de terneros por E. coli O157:H7, lo que consiste en una valiosa herramienta para el ensayo de vacunas o agentes terapéuticos. Sin embargo falta aún ajustar aspectos como la influencia de la dieta y la edad del animal en la colonización experimental que permitan prolongar el período de excreción.