Vacuna basada en fantasmas de E. coli O157 disminuye la excrecion de E. coli O157 en terneros.

VILTE DA; LARZÁBAL M; LUBITZ W; CATALDI A; MERCADO EC

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Latinoamericano de Zoonosis, VI Congreso Argentino de Zoonosis; 2008

  El ganado bovino es el principal reservorio de Escherichia coli enterohemorrágico (EHEC) O157:H7, bacteria que en el ser humano causa el síndrome urémico hemolítico (SUH). La obtención de vacunas que eviten la colonización del ganado por EHEC O157:H7 sería una de las principales herramientas de un programa de control del SUH (1). En este trabajo se evaluó una vacuna a base de fantasmas bacterianos, consistentes en envolturas libres de DNA de E. coli O157:H7 (2). Se seleccionaron terneros de 6 meses no excretores de EHEC O157:H7 con títulos de IgG contra fantasmas de O157:H7 determinados por ELISA menores a 100. Cinco terneros recibieron 2 dosis de vacuna por vía sc con un intervalo de 21 días. Otros 5 terneros vacunados con PBS se usaron como grupo placebo. Se tomaron muestras semanales de suero y materia fecal para la determinación de IgG e IgA en suero e IgA en materia fecal contra fantasmas y proteínas específicas de EHEC como alfa-Intimina y EspB mediante ELISA. Los terneros recibieron 109 UFC de una mutante natural resistente a ácido nalidíxico (NalR) mediante sonda nasogástrica el día 35. Durante 15 días se determinó la excreción de la cepa, mediante recuento a partir de materia fecal en MacConkey Sorbitol-Telurito-Nalidíxico (SMAC-TN), y enriquecimiento de hisopados de la unión recto-anal en caldo Triptona Soja-Nalidixico seguido de separación inmunomagnética (SIM), aislamiento en SMAC-TN y PCR para stx1, stx2, eae y rfbO157 de zona de confluencia. Al finalizar la experiencia se tomaron muestras de suero y materia fecal para seguimiento de IgG e IgA específicas. Los animales fueron eutanizados siguiendo las pautas del Comité de Bienestar Animal de INTA, tomándose segmentos intestinales para determinar la presencia de E. coli O157:H7 NalR. Se observó diferencia significativa (p < 0.01) en la duración, pero no en el nivel de excreción entre vacunados y placebos. A los 7 días de inoculación, la excreción de O157:H7 NalR cayó a niveles no detectables por recuento en ambos grupos, aunque los placebos continuaron excretando en bajo número, según se detectó por SIM. En uno de los placebos se aisló la cepa inoculada de tejido recto-anal e ileon. En suero, IgG contra fantasmas aumentó significativamente en los vacunados, no así IgA, ni IgG anti gamma- Intimina y EspB. Diluciones 1:1 de materia fecal no revelaron diferencias en el nivel de sIgA específicas entre ambos grupos. La respuesta inmune sería inefectiva con alta  carga bacteriana, pero luego los animales inmunizados podrían controlar la infección y erradicar la bacteria. Anticuerpos IgG contra antígenos superficiales podrían contribuir a disminuir la colonización intestinal por E. coli O157:H7, como se observó en el patógeno murino Citrobacter rodentium (3).