Detección de Escherichia coli O157:H7 perteneciente al hipervirulento clado 8 en bovinos de Argentina.

LARZÁBAL M; RABINOVITZ BC; BALDONE V; MOREIRA AR; ELIZONDO AM; VILTE DA; MAZZEO M; CATALDI A; PIANCIOLA L; MERCADO EC

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010

Asociación Argentina de Microbilogía

Introducción: <i>Escherichia coli</i> O157:H7 es el serotipo de E. coli productor de toxina Shiga (STEC) más frecuentemente asociado con el síndrome urémico hemolítico (SUH) en humanos. El ganado bovino y otros rumiantes son considerados el reservorio primario de este serotipo. Recientemente se han identificado diferencias genotípicas y fenotípicas entre cepas  aisladas de bovinos y humanos. Se ha determinado que STEC O157:H7 posee diversidad genómica relacionada a eventos de recombinación genética mediados por bacteriófagos y otros mecanismos de transferencia genética horizontal, algunos de los cuales resultan en diferencias en locus asociados a genes de virulencia, incluyendo los que codifican adhesinas, toxinas Shiga y proteínas efectoras. Mediante análisis de 96 polimorfismos de nucleótido único (SNP) se han identificado 39 genotipos agrupados en 9 clados. La emergencia del clado 8 en brotes recientes ocurridos en EE UU por consumo de vegetales contaminados ha sido relacionada con el elevado número de internaciones y casos de SUH. En Argentina el SUH es endémico, con más de 500 casos reportados anualmente en niños. La presencia de cepas STEC O157:H7 pertenecientes a linajes hipervirulentos en el ganado bovino podría contribuir a dicha situación epidemiológica. Objetivo: caracterizar el toxinotipo y la pertenencia al clado 8 de cepas STEC O157:H7 de origen bovino. Materiales y Métodos: Se estudiaron 16 cepas de STEC O157:H7 aisladas de 49 terneros de feedlot, cría y tambo de 3-8 meses provenientes de 4 establecimientos ubicados en Santa Fé, La Pampa, noreste y centro de Buenos Aires, respectivamente. La detección de los genes stx1, stx2, eae, ehxA, y rfbO157 de realizó por PCR múltiple. El antígeno H7 se determinó por aglutinación. Los subtipos de stx2 se determinaron por PCR-RFLP. Para identificar el clado 8, se realizó una PCR en tiempo real (RT-PCR) utilizando cebadores en horquilla (hairpin primers-HP-) dirigidos contra el SNP 539 ubicado en el marco de lectura ECs2357, característico del clado 8. Resultados: Catorce cepas presentaron las variantes stx2- stx2c, dos la variante stx2 y ninguna el gen stx1. Ninguna de las cepas presentó el gen stx2dactivable. Todas las cepas fueron positivas para los genes eae, ehxA y rfbO157, y aglutinaron con antisuero H7. De las 16 cepas, 12 (75 %) pertenecieron al clado 8. Conclusiones: El clado 8 y los subtipos stx2- stx2c de E. coli O157:H7 están asociados a las formas clínicas severas en humanos. Si bien se requiere un estudio genético más completo para determinar si estas cepas y las aisladas de humanos en Argentina pertenecen a un genotipo único, estos resultados sugieren una alta incidencia de cepas E. coli O157:H7 clado 8 que poseen las variantes de toxina Shiga más frecuentes en casos de SUH por STEC O157 en Argentina.