Diagóstico HLB

JUAN PEDRO AGOSTINI; MARÍA JOSÉ BLARIZA

2019-07-01

2019-08-01

Sanidad vegetal

Se relevaron 20 lotes de distintas especies/variedades cítricas en 40 Ha de la plantación de cítricos María Magdalena S.A. - Colonia Mado, Depto Eldorado, Misiones sobre Ruta Nacional 12. Cada lote fue relevado en el 100% de los árboles. Descripción de muestras tomadas: En el caso de síntomas de amarillamientos o similares a la enfermedad se tomaron muestras de las mismas para enviarlas a analizar a nuestro laboratorio, GIGA. Las hojas y/o frutos fueron colocados en bolsas de polietileno, rotuladas y colocadas en conservadora hasta su envío a laboratorio. En el caso de no observarse síntomas tal como especificado anteriormente se tomaron muestras compuestas de diversas hojas del lote para su envío a laboratorio. Se colectaron un total 10 muestras en total. Las muestras fueron enviadas al Laboratorio dentro de las 24 horas de tomadas en el campo.Procedimiento de laboratorio y Extracción de Ácidos Nucleicos: Para realizar la extracción de ADN desde las hojas se procedió a macerar las nervaduras de las mismas con nitrógeno líquido. La purificación de ADN se llevó a cabo mediante el método de CTAB de Murray y Thompson (1980). La integridad y concentración del ADN se corroboraron mediante electroforesis en gel de agarosa y cuantificación en espectrofotómetro, respectivamente. Diagnóstico de Candidatus Liberibacter asiaticus: Se utilizó una Nested PCR mediante cebadores específicos que permiten la detección de CLA en hojas de cítricos por la amplificación de un fragmento de 1160 pb de una región del 16S ADNr. El procedimiento de la Nested PCR consiste en una primera ronda utilizando el set de primers fDl/rD1 y una segunda ronda empleando los primers específicos para CLA, Oi1/Oi2c.Resultados:Resultados de laboratorio de todas las muestras tomadas, incluso de dos plantas sospechosas también fueron negativas.