Aislamiento de genes de citocromos P450 en el vector de la Enfermedad de Chagas Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae)

GROSSO CG; SORIA NW; BLARIZA MJ; GARCIA BA

Congreso; XL Congreso Argentino de Genética - III Simposio Latinoamericano de Citogenética y evolución - I Jornadas Regionales SAG-NEA; 2011

En Argentina al igual que en otros países de Latinoamérica, se han utilizado insecticidas piretroides por más de 20 años para el control del vector de la enfermedad de Chagas, Triatoma infestans. Sin embargo, esta estrategia ha presentado fallas debido a la existencia de resistencia a estos insecticidas. Las evidencias sugieren que el incremento de la actividad de enzimas mono-oxigenasas citocromo P450 es uno de los mecanismos responsables de la resistencia al aumentar el metabolismo de insecticidas. Con el propósito de analizar en T. infestans genes frecuentemente asociados a la resistencia a insecticidas, se inició el estudio con la identificación de fragmentos de ADN copia (ADNc) de genes P450 (CYP450). Se amplificaron esos fragmentos utilizando primers degenerados e inespecíficos diseñados a partir de regiones conservadas de CYP450 de otras especies de insectos, mediante la técnica de PCR. La secuenciación de los productos de PCR (directa o posterior a su clonación), permitió la obtención de fragmentos correspondientes a 3 genes CYP450: a) un fragmento de 1140 pares de bases (pb), constituido por 962 pb codificantes, un codón stop y 175 pb 3’ no codificantes; b) otro de 796 pb que también incluye el codón stop, con 598 pb codificantes y 195 pb 3’ no codificantes; y c) un fragmento de menor tamaño que corresponde a 275 pb codificantes. Las secuencias de aminoácidos deducidas a partir de las secuencias nucleotídicas de ADNc mostraron entre el 59% y 78% de homología con secuencias de aminoácidos de citocromos P450 de diversas especies de insectos.