EFECTO NEUROPROTECTOR DE LA ERITROPOYETINA. REGULACIÓN DEL RECEPTOR DE ERITROPOYETINA Y DEL RECEPTOR DE TNF.

PREGI, NICOLÁS; WENKER, SHIRLEY; VOTA, DAIANA, PEREZ LEIROS, CLAUDIA; NESSE, ALCIRA

Mar del Plata

Congreso; 51 reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas

El rol biológico y fisiológico de la eritropoyetina (Epo) se ha expandido al demostrar su acción en células de origen neuronal. El TNF es una citoquina que al unirse a su receptor (TNFR) puede inducir apoptosis o proliferación en distintos tipos celulares. El presente trabajo fue diseñado para investigar mecanismos que median la actividad protectora de Epo sobre células neuronales empleando la línea de neuroblastoma humano SH-SY5Y como modelo de apoptosis inducida por TNF (25 ng/ml). La apoptosis fue evaluada por la técnica de ladder, cambios morfológicos del núcleo, clivaje de la proteína PARP y actividad de caspasa-3. El efecto neuroprotector fue puesto en evidencia por el pretratamiento con Epo (25 U/ml). Se realizaron ensayos con inhibidores de vías de señalización, evaluando expresión por Real Time PCR y Western Blot. El pretratamiento con Epo previno la apoptosis inducida por TNF, explicable en parte por un leve aumento del EpoR. La expresión del TNFR1 disminuyó por el pretratamiento con Epo y dicha disminución fue revertida al agregar AG490 25 uM (inhibidor de Jak2), genisteína 10 uM (inhibidor de Tirosina Kinasas) o LY294002 25 uM (inhibidor de PI3K), indicando que estas vías estarían involucradas en la regulación de la expresión del TNFR1 por Epo. Se observó un aumento de la activación de NFkB al agregar Epo, mientras que el tratamiento con TNF provocó un aumento del inhibidor IkB, efecto que fue revertido al agregar previamente Epo. Esto sugiere que existe una interacción entre las señales activadas por Epo y TNF, que provocaría la activación de NFkB y su inhibidor IkB. La activación de NFkB, sumado a la de otros factores de transcripción, mediaría el efecto neuroprotector de Epo. La comprensión de los mecanismos de regulación, así como el conocimiento de las acciones no eritropoyéticas de la Epo, son de relevancia para la evaluación de nuevas terapias para el tratamiento de distintas enfermedades.