INTERFERÓN RECOMBINANTE PARA MASCOTAS PRODUCIDO EN LARVAS DEINSECTOS

ALEXANDRA M. TARGOVNIK; MARCELA SOLANGE VILLAVERDE; MARIANA B. ARREGUI; MARINA CURATOLA; GERARDO CLAUDIO GLIKIN; LILIANA MARÍA ELENA FINOCCHIARO; OSVALDO CASCONE; MARIA V. MIRANDA

Buenos Aires

Congreso; 8º CONGRESO Y EXPOSICIÓN PARA LA CIENCIA Y TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, BIOTECNOLÓGICA Y VETERINARIA; 2014

El interferón felino (FeIFN) es una citoquina que se aplica en la industria veterinaria para eltratamiento y prevención de enfermedades virales y neoplasias de origen felino y canino yque no se comercializa en nuestro país. El objetivo de este trabajo fue producir FeIFNrecombinante (rFeIFN) en el sistema baculovirus-larvas de Rachiplusia nu. Se construyó unbaculovirus recombinante donde el gen de FeIFN fue clonado bajo el promotor de poliedrinay el péptido de secreción de origen viral GP67. Por otra parte, se modificó el puntoisoeléctrico (pI) del rFeIFN mediante el agregado de una etiqueta de 8 argininas en suextremo carboxilo. El nivel de expresión obtenido a partir de larvas de R. nu infectadas fuede (3.7±0.3) x 106 U/larva. El pI del rFeIFN varió de 6,5 a 9,15 y este cambio no afectó suactividad biológica. Finalmente, el rFeIFN fue purificado por cromatografía de intercambioiónico (HiTrap SP Fast Flow 1 ml, GE Healthcare) a pH 7,0, seguido de una cromatografíade interacción hidrofóbica (Phenyl Sepharose Fast Flow High sub, 1 ml, GE Healthcare). Seobtuvo una proteína libre de partículas virales. Los resultados obtenidos alientan eldesarrollo de esta plataforma biotecnológica para la producción de interferones de usoveterinario basada en larvas de R. nu.