EFECTOS DE LA TERAPIA GÉNICA CON INTERFERÓN-OMEGA EN CÉLULAS DE CARCINOMA MAMARIO Y MELANOMA FELINO

MARCELA SOLANGE VILLAVERDE; ALEXANDRA MARISA TARGOVNIK; R.D. BAFFICO; MARÍA VICTORIA MIRANDA; GERARDO CLAUDIO GLIKIN; LILIANA MARÍA ELENA FINOCCHIARO

Buenos Aires

Jornada; XXVIII Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto ¨Angel Roffo¨; 2012

Instituto Oncológico Dr Angel Roffo

Los interferones son citokinas con actividad antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora que modifican tanto la respuesta innata como adaptativa. El único interferón recombinante que posee licencia para el tratamiento de diversas virosis felinas y caninas es el IFNω felino recombinante (rfIFNω). La transferencia del gen de esta citokina constituiría una nueva herramienta farmacológica más tolerable y con similar o mayor efectividad que la proteína recombinante. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue explorar el uso de la terapia génica mediada por el gen del fIFNω siguiendo los siguientes pasos: a) clonar el gen fIFNω, b) establecer líneas tumorales felinas, c) evaluar el efecto de la lipofección del gen fIFNω en las líneas tumorales establecidas y d) compararlo con el efecto del agregado exógeno de la proteína comercial rfIFNω. Hasta el momento, (i) se clonó el gen fIFNω en un vector plasmídico de alta expresión, (ii) se verificó su actividad biológica y su reconocimiento con un anticuerpo policlonal específico en western blot; (iii) se estableció una línea de carcinoma mamario felino (Al) y una de melanoma felino (Rn), ambas cultivables como monocapas y esferoides (este último representa un modelo más realista de la morfología tumoral). Se comprobó que la lipofección del gen fIFNω resultó altamente citotóxica para ambas líneas celulares (evaluado mediante la actividad de la enzima fosfatasa ácida; p<0,001 para monocapa y p<0,01 para esferoides) y que el efecto del gen fue similar al que se observó con el agregado de altas concentraciones de la proteína rfIFNω (1000 UI/ml). Además, la lipofección del gen fIFNω no generó efectos citotóxicos en la línea comercial CRFK (riñón felino normal) que se utilizó como control. Dada su alta efectividad in vitro, se propone continuar con el estudio del gen fIFNω como terapia antitumoral felina. Además, teniendo en cuenta que el tratamiento sea efectivo aún con bajas eficiencias de transferencia genética, cabe destacar que en estos experimentos solo el 1% de las células expresaba el gen en cantidades significativas. La lipofección del gen fIFNω podría resultar una estrategia ventajosa (tanto en efectividad como en costo) e innovadora respecto al uso de la proteína recombinante para el tratamiento de neoplasias u otras patologías felinas. Próximamente evaluaremos los efectos antitumorales de la lipofección del gen fIFNω en el marco de un protocolo clínico veterinario para el tratamiento de tumores que aún no cuentan con una terapia adecuada.