Caracterización de las propiedades inmunomodulatorias de las proteínas Hsp90 de plantas

CORIGLIANO, M; SANCHEZ-LOPEZ, EDWIN; BENGOA-LUONI, SA; SANDER, VA; CLEMENTE, M

La Plata

Taller; Taller de Vacunología 2018- Tercera Edición; 2018

Asociacón Argentina de Microbiología- IBBM-UNLP

La capacidad inmunomodulatoria de las Hsp90 de mamíferos y patógenos ha sido reportada previamente, pero hasta le fecha nada se sabe del rol de las Hsp90 de plantas en la modulación de la respuesta inmune (RI). Este estudio fue abordado mediante dos aspectos: por un lado, evaluamos las propiedades de las Hsp90 de plantas en la RI independiente del péptido acarreado. Para ello se clonaron, expresaron y purificaron las proteínas recombinantes de las isoformas Hsp81.2 de Arabidopsis thaliana (AtHsp81.2) y Hsp90.3 de Nicotiana benthamiana (NbHsp90.3). Reportamos que AtHsp81.2 y NbHsp90.3 son mitógenos de linfocitos CD19+, que las proteínas rHsp90 se unen directamente a dichas células y se caracterizó la participación del TLR4 en la inducción de la proliferación. Conjuntamente, estudiamos diferentes receptores expresados transientemente en líneas celulares y observamos que las proteínas rHsp90 de plantas tienen capacidad para unirse diferencialmente a los distintos receptores. Por otro lado, estudiamos la RI específica contra el péptido al cual las Hsp90 de plantas se encuentran unidos. Como primera a aproximación, se clonó y expresó la rNbHsp90.3 fusionada a un antígeno reportero MBP. Se observó que la proteína de fusión rNbHsp90.3-MBP indujo un aumento en la expresión de CMH clase I, lo que derivó en una fuerte y prolongada RI pro-inflamatoria específica contra el antígeno fusionado, con generación de IgG2a e IFNγ. Considerando que el análisis con antígenos genéricos no refleja necesariamente la respuesta biológica a inmunógenos derivados de patógenos, se decidió continuar la caracterización de las rHsp90 como adyuvantes dos parásitos intracelulares (Toxoplasma gondii y Neospora caninum) como modelos de estudio. Demostramos por primera vez que las proteínas Hsp90 derivadas de un organismo no patogénico, en este caso las plantas, pueden unirse a receptores de manera específica y producir una fuerte y prolongada RI pro-inflamatoria específica contra el antígeno.