El estrés por sobrecarga de albúmina induce la expresión de las MAP quinasa fosfatasas 1 y 2 (MKP-1 y MKP-2) en células de túbulo proximal renal

GOROSTIZAGA, A.; ACQUIER, A.; GOMEZ, N.; MORI SEQUEIROS GARCIA, M.; MENDEZ, C.F.; PAZ, C.

Mar del Plata, Pcia. de Buenos Aires

Congreso; LVI Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La sobrecarga de albúmina produce en células de túbulo proximal renal un tipo de estrés denominado estrés por retículo (ER). El ER desencadena la activación de las MAP quinasas(MAPKs) ERK1/2 y JNK1/2, las cuales tienen efectos sobre la supervivencia o la apoptosis de estas células frente a este tipo de injuria. Los estímulos que promueven la activación de las MAPKs inducen la expresión de diferentes miembros de la familia de MAPK fosfatasas(MKPs), enzimas que promueven la inactivación de estas quinasas. Dado que se desconoce el efecto de la sobrecarga de albúmina sobre la expresión de las MKPs 1 y 2 (MKP-1, MKP-2), el objetivo fue establecer si en células OK (Opposum kidney), una línea celular de túbulo proximal renal, el estrés por sobrecarga de albúmina induce MKP-1/-2 y en que grado el nivel de MKP-1 promueve la inactivación de las MAPKs. Mediante Western blot, utilizando anticuerpos contra las formas fosforiladas de las MAPKs, comprobamos que la albúmina produce la activación de ERK1/2 y JNK1/2 en forma dependiente del tiempo y de la concentración. El análisis por Western blot reveló que la albúmina (20 mg/ml) promueve la acumulación de MKP-1 (2 veces respecto al control luego de 1 hora de estimulación). Efecto similar se observó sobre los niveles de MKP-2 luego de 2 horas de estimulación. En células transfectadas para la expresión transitoria de la proteína recombinante flag-MKP-1, el estímulo con albúmina aumentó los niveles de la proteína recombinante a partir de los 15 min de estimulación, determinados por Western blot. Además, la sobre-expresión de MKP-1 disminuyó la fosforilación de ERK1/2 promovida por albúmina. Concluimos que en células OK el ER produce un incremento en los niveles de MKP-1 y MKP-2. Respecto de MKP-1 el incremento involucraría eventos post-traduccionales, aunque no se descarta una acción a nivel transcripcional. La inducción de MKP-1 por albúmina contribuiría al "apagado" de la señal, por su acción -al menos- sobre ERK1/2.