ARTIST, una acil-CoA tioesterasa mitocondrial, intermediaria obligatoria en la síntesis de esteroides es regulada por ACTH

CASTILLA LOZANO, R.; MALOBERTI, P.; MELE, P.; COLONNA, C.; MENDEZ, C.F.; PAZ, C.; PODESTÁ, E.J.

Mar del Plata, Provincia de Buenos Aires

Congreso; XLVII Reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2002

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente hemos demostrado que una acil-CoA tioesterasa mitocondrial (ARTISt) es obligatoria en la regulación hormonal de la esteroidogénesis. La actividad de ARTISt, es regulada por fosforilación y medida por su capacidad para estimular la esteroidogénesis en un bioensayo, postulándose que ARTISt libera ácido araquidónico (AA) directa o indirectamente por acción de ACTH. El objetivo del presente trabajo fue demostrar que ACTH regula la actividad enzimática de ARTISt. Para ello se aislaron mitocondrias de células Y1 incubadas en ausencia o en presencia de ACTH por 5 y 30 minutos. La actividad enzimática se ensayó utilizando como sustrato araquidonoil-CoA y midiendo el AA liberado. ACTH (5 mIU/ml) incrementa 1,8 veces (desde 1,59 + 0,22 a 3,0 + 0,25) la actividad de ARTISt a los 5 minutos. La activación de la enzima protege a la misma de la inhibición por ácido nordihidroguaiarético (NDGA) inhibidor de la esteroidogénesis. ARTISt clonada y expresada tiene un Km de 2 uM utilizando araquidonoil-CoA como sustrato. Anticuerpos obtenidos contra la enzima expresada en bacteria detectan ARTISt en células Y1 y en adrenales. Estos resultados demuestran por primera vez que ACTH puede regular la actividad enzimática de una acil-CoA tioesterasa.