Caracterización molecular de cepas dentro del complejo Fusarium graminearum aisladas de soja

BARROS, G.; ALANIZ ZANON, M. S.; REYNOSO, M.M; RAMIREZ, M.L.; TORRES, A.; CHULZE, S.

Posadas

Congreso; XII Congreso Argentino de Micología y XXII Jornadas Argentinas de Micología; 2011

Asociación Argentina de Micología

Durante muchos tiempo se pensó que el agente causal de la fusariosis de la espiga de trigo, F. graminearum sensu stricto (teleomorfo G. zeae), era una única especie. Actualmente, en base a estudios de reconocimiento de especies filogenéticas, se demostró que existen al menos 13 linajes separados estructural y biogeográficamente. Los estudios realizados en nuestro país con respecto a este complejo se han centrado fundamentalmente en trigo y maíz, pero poco se sabe a cerca de estas poblaciones en soja. Trabajos previos demuestran que especies del complejo son importantes en este cultivo tanto desde el punto de vista toxicogénico como patogénico. Realizar una caracterización molecular de cepas pertenecientes al complejo Fusarium graminearum aisladas de soja a través del uso de marcadores moleculares generados por el polimorfismo en la longitud de los fragmentos amplificados (AFLPs). Se analizaron 34 cepas pertenecientes al complejo F. graminearum aisladas en un estudio previo (Barros et al. 2010). El ADN se extrajo con buffer CTAB siguiendo la metodología propuesta por Leslie y Summerell (2006). La inclusión de las cepas dentro del complejo F. graminearum se realizó utilizando cebadores específicos Fg16F/Fg16R descriptos por Nicholson et al. (1998). Los marcadores AFLPs se generaron siguiendo la metodología propuesta por Vos et al. (1995) modificado por Leslie y Summerell (2006) y fueron comparados con los patrones de cepas de referencia pertenecientes a los diferentes linajes descriptos hasta el momento. La utilización de cebadores específicos Fg16F/Fg16R mostró que todas las cepas analizadas produjeron un fragmento esperado de 450-500 pb, dependiendo de cada cepa. El análisis por AFLP evidenció que de las 34 cepas analizadas, 17 de ellas presentaron perfiles típicos de F. graminearum sensu stricto (linaje 7), mientras que 5 cepas se agruparon con la cepa de referencia de F. meridionale (linaje 2). Todas las cepas caracterizadas como F. graminearum sensu stricto mostraron un genotipo 15-AcDON, mientras que las cepas caracterizadas como F. meridionale mostraron un genotipo DON/NIV. A partir de estas 22 cepas y utilizando dos combinaciones de cebadores (EcoAA/MseIAT y EcoTT/MseITG) se identificaron 86 loci de AFLP, de los cuales el 77,9% fueron polimórficos (67 loci). Del total de cepas analizadas, 12 no mostraron un patrón de bandas que permitiera asociarlas consistentemente a ninguna de las cepas patrón incluidas en el análisis por lo que fue necesario un análisis de secuencia. La utilización de cebadores específicos permitió incluir a las cepas analizadas dentro del complejo F. graminearum. El análisis de AFLPs permitió definir que las cepas dentro del complejo aisladas de soja pertenecen a más de una especie.