Effects of Melia azedarach extract on T. cruzi epimastigotes proliferation.

L. FRACCAROLI; MD. RUIZ; P. TORRES; L. LAROCCA; C. CARRILLO; V. DE PINO

Mar del Plata

Congreso; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología en el marco de la Reunión Anual de Biociencia 2019.; 2019

Effects of Melia azedarach extract on T. cruzi epimastigotes proliferationMelia azedarach (MA), popularmente conocido como árbol de Paraíso, es una especie nativa de Asia pero distribuida ampliamente de muchos países. Se ha descripto que esta especie posee propiedades terapéuticas como antifúngico y antihelmíntico. En este trabajo evaluamos la capacidad tripanocida de extractos de MA obtenidos de frutos maduros por dos métodos. El método 1 consistió en secar los frutos a 37°C para obtener un polvo (sin semilla) y luego se realizó la extracción con agua, etanol y DMSO como solventes. El método 2 consistió en una extracción con Soxhlet utilizando etanol como solvente; dicho extracto fue evaporado y luego resuspendido en DMSO. Ambos extractos fueron evaluados en concentraciones crecientes (0 a 10 mg/ml) sobre cultivos de epimastigotes de T. cruzi de la cepa Y. Para el método 1, solo los extractos obtenidos con DMSO disminuyeron de forma dosis dependiente la proliferación de los epimastigotes con una EC50 de 0,94 mg/ml (0,81 ? 1,09 mg/ml) al día 4 de cultivo. Dichos extractos fueron conservados a 4°C y -20°C durante 15 días para evaluar su estabilidad. Observamos que el extracto a -20°C mantuvo su actividad mientras que el extracto a 4°C disminuyó su actividad a la mitad (cálculo de EC50 al día 4). El extracto obtenido por el método 2 mostró efectos comparables con el primer extracto con una EC50 de 0,67 mg/ml (0,55 ? 0,81 mg/ml) al día 4 de cultivo (Figura 12). Evaluamos la citotoxicidad de dicho extracto por ensayo de MTT en células VERO obteniendo un índice de selectividad de 1,2 (CC50 VERO: 1,12 mg/ml/ EC50 epimastigotes); si bien este índice no es óptimo, es similar al obtenido para nifurtimox y benznidazol para epimastigotes de T. cruzi. Profundizando el análisis, realizamos una separación del extracto por HPLC y recolectamos diversas fracciones. Nuestros resultados preliminares muestran que las fracciones individuales no poseen efecto sobre la proliferación de epimastigotes, mientras que combinando todas las fracciones logramos restaurar el efecto. Actualmente, estamos evaluando diversos protocolos de separación por HPLC para poder ir caracterizando químicamente a los compuestos presentes en dicho extracto. Estos resultados sugieren que los extractos de frutos maduros de MA poseen compuestos bioactivos que afectan la viabilidad y proliferación de epimastigotes de T. cruzi y que esta actividad citotóxica podría ser el resultado de la interacción de diversos compuestos presentes en el extracto.Si bien el estudio es preliminar, se observó que el extracto tiene compuestos bioactivos que afectan la viabilidad de los parásitos.