PROCESO BIOCATALÍTICO DE SINTESIS DE 7-O-β-GLUCOSIL-HESPERETINA

ROCIO DE LEON; MICAELA BAGLIONI; LAURA S. MAZZAFERRO

Jornada; 13ºJornadas pampeanas de ciencias naturales y ambientales; 2022

Las α L ramnosidasas (E.C. 3.2.1.40) son glicosidasas que reconocen e hidrolizan residuos terminales de α L ramnosa, presentes en numerosos metabolitos vegetales. En este trabajo se utilizó la α-L-ramnosidasa de Actinoplanes missouriensis 431T (= NRRL B-3342), para la obtención de 7-O-β-glucosil-hesperetina, producto de alto valor agregado. En primer lugar, la enzima se produjo de manera heteróloga en E. coli, y la fracción soluble del lisado se utilizó como recurso enzimático. El compuesto hesperidina (7-O-rutinosil-hesperetina), que se encuentra en abundante cantidad en los desechos de la industria citrícola, se utilizó como reactivo. La α-L-ramnosidasa de A. missouriensis 431T produjo de manera selectiva 7-O-glucosil-hesperetina y β-ramnosa a partir de hesperidina. Se optimizaron las condiciones reacción incluyendo concentración inicial de hesperidina (1.8 mM), temperatura (28ºC), pH (50 mM buffer citrato de sodio pH 6), tiempo de reacción (3 h), y concentración de enzima (0.036 U/ml). El máximo rendimiento fue del 59 %. El compuesto obtenido permitirá estudiar experimentalmente los subsitios de unión al sustrato de los cuales depende la regioespecificidad de diferentes glicosidasas.