Ventajas de la tinción con Naranja de Acridina en la aplicación del test de micronúcleo

POLETTA, G.; SIMONIELLO, M.F.; KLEINSORGE, E; LOTESTE, A.; PARMA, J.; CAMPANA, M.

Santa Fe, Argentina

Jornada; Encuentro Bioquímico del Litoral, VI Jornadas de Comunicaciones Técnico Científicas; 2005

Facultad de Bioquímica y Ciencias Biol-UNL

El test de Micronúcleo (MN) se utiliza para evaluar la capacidad mutagénica de un contaminante. Los estudios realizados con este test difieren respecto a la técnica empleada para teñir los preparados. La tinción con Giemsa ha sido frecuentemente utilizada, no obstante, presenta la desventaja de que la solución de trabajo (dilución a partir de la solución comercial) se deteriora con el tiempo perdiendo su capacidad de tinción, por lo que debe ser preparada inmediatamente antes de su utilización. Además, debe ser centrifugada o filtrada para eliminar los grumos que estuvieran presentes y pudieran interferir en la identificación de los MN.  Por otra parte, en numerosos trabajos se ha empleado el colorante Naranja de Acridina debido a que es una técnica de tinción rápida y confiable que ha demostrado ser sensible en la identificación de MN. Su única desventaja es que se requiere un microscopio de fluorescencia, cuyo costo es considerablemente mayor que el equipamiento necesario para la observación de preparados teñidos con Giemsa. El propósito de este trabajo fue evaluar las dos técnicas de tinción antes mencionadas, con el objeto de determinar cuál de ellas es recomendable para su utilización en el test de MN. Para la realización de los preparados se utilizó sangre entera extraída de ocho ejemplares de Sábalo (Prochilodus lineatus) previamente expuestos a Cypermetrina y al mutágeno de control: Colchicina. Se realizaron dos frotis sanguíneos por cada ejemplar, uno de los cuales se tiñó con Giemsa y el otro con Naranja de Acridina. Se registró la frecuencia de eritricitos con MN por cada 1000 eritrocitos de cada preparado y de cada ejemplar. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias en la frecuencia de MN entre las muestras teñidas de manera diferente. Por lo tanto, debido a que la tinción con Naranja de Acridina presenta igual sensibilidad y requiere menor tiempo y trabajo en comparación a la tinción con Giemsa, concluimos que esta técnica puede ser más adecuada para teñir preparados en la aplicación del test de MN, aunque deben tenerse en cuenta los costos y los accesorios especiales requeridos.