Evaluación del efecto genotóxico estadio-dependiente del Roundup® en Caiman latirostris

BURELLA, PAMELA; SIMONIELLO, MA. FERNANDA; SIROSKI, PABLO A.; POLETTA, GISELA L.

Santa Fe

Encuentro; Encuentro de Jóvenes Investigadores (EJI 2013); 2013

Instituto Nacional de Limnología

Considerando los efectos tóxicos de formulaciones de glifosato probados sobreespecies silvestres como Caiman latirostris, el objetivo de este trabajo fue evaluar lasensibilidad de los embriones a la exposición a Roundup en distintas etapas deldesarrollo embrionario, suponiendo que podría existir un efecto estadio-dependiente. Se utilizaron 130 huevos pertenecientes a 5 nidos del Proyecto Yacaré (Gob. Santa Fe/MUPCN). Se trabajó con 3 grupos experimentales por cada una de 3 concentraciones efectivas de la formulación Roundup® Determinadas en un estudio previo (750, 1250, 1750 μg/huevo de RU; Poletta et al. 2009), 3 grupos expuestos alagente genotóxico Ciclofosfamida como control positivo (CP: 700 μg/huevo) y un control negativo (CN) no expuesto, cada uno con 10 huevos. El período de incubación (70 ± 3 días) se dividió en tres etapas de aproximadamente 23 días cada una, de manera que los 3 grupos tratados con una misma concentración de RU o CP fueron topicados al inicio de cada una de esas etapas del desarrollo embrionario (primera,segunda y tercera), con el objeto de evaluar la sensibilidad de los embriones al RU dependiendo de su estadio. Los huevos fueron incubados en la incubadora del PY a una temperatura de 31 ± 1 ºC y humedad del 95%. En el momento del nacimiento se tomaron muestras de sangre de la vena espinal (0,5 ml) para la aplicación de ensayo cometa (EC), del test de micronúcleos (MN) y AN a todos los animales, y luego se midieron y pesaron. No se encontraron diferencias de tamaño entre los animales de los diferentes grupos experimentales al momento de nacer. Los resultados correspondientes al EC, mostraron una diferencia significativa en el ID entre los grupos expuestos a CP, RU1250 y RU1750 y el CN (p0.05), indicando que el RU produce daño al ADN en embriones de C. latirostris independientemente de la etapa del desarrollo en la que se produce la exposición. En el caso de la frecuencia de MN y AN, no se encontraron diferencias significativas entre los grupos expuestos. Las diferencias observadas en los resultados de EC, MN y AN, pueden deberse a los distintos tipos de daño que se detectan con cada técnica. Mientras el test de MN registra alteraciones a nivel cromosómico y las AN se consideran complementarias al mismo, el de EC identifica rupturas de hebra simple y maximiza la expresión de sitios álcali-lábiles en la molécula de ADN, transformándolos rápidamente a rupturas de cadena bajo condiciones alcalinas. Por lo tanto, el EC puede ser más sensible que el test de MN y AN para detectar daños a la molécula de ADN.