Ensayo cometa y Test de micronúcleos como biomarcadores de genotoxicidad en la Iguana overa (Tupinambis merianae)

SCHAUMBURG, LAURA G. ; POLETTA, GISELA L.; SIROSKI, PABLO A.; MUDRY, MARTA D.

Corrientes

Conferencia; XL Congreso Argentino de Genética/ III Simposio Latinoamericano de Citogenética y Evolución/ I Jornadas Regionales SAG-NEA; 2011

Sociedad Argentina de Genética

La iguana overa (Tupinambis merianae) es una especie de reptil endémico de América del Sur expuesta a agroquímicos por habitar en cercanías de áreas con intensa actividad agrícola. Numerosos y diversos estudios demostraron efectos genotóxicos generados por estos compuestos químicos en distintas especies. La bibliografía de T. merianae no registra datos de estos efectos ni del uso del test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa (EC) como biomarcadores de monitoreo genotóxico. El objetivo de nuestro trabajo fue adaptar y optimizar las técnicas de MN y EC en eritrocitos de T. merianae como biomarcadores de genotoxicidad in vivo asociada a plaguicidas. Se desarrollaron dichas técnicas sobre muestras de sangre periférica de 6 ejemplares adultos (hembras y machos) según protocolos previamente establecidos en nuestro grupo de trabajo con otra especie de reptil. Para el test de MN, se realizaron 2 frotis/ejemplar, se fijaron, se tiñeron con Giemsa al 10%, obteniéndose preparados de buena calidad. La media de MN observada en la puesta a punto fue: 1,05 ± 0,37. Para el EC se probaron diferentes condiciones de densidad celular, unwinding y electroforesis. Los resultados permitieron determinar las condiciones óptimas para la aplicación del EC en esta especie: densidad celular 4 x 103 eritrocitos por muestra, 10 min unwinding y 15 min electroforesis a 25 V y 300 mA (aprox. 0,90 V/cm). Ambos biomarcadores demostraron ser sensibles en eritrocitos de T. merianae permitiendo proponer esta especie autóctona como organismo centinela para monitoreo de genotoxicidad de plaguicidas en su área de distribución natural.