Efectos de sobre la internalización de en células epiteliales mamarias bovinas y sobre la fagocitosis de macrófagos aislados de secreción mamaria.

BECCARIA, C.; SILVESTRINI, P; RENNA MS; ORTEGA HH; CALVINHO LF; DALLARD BE; BARAVALLE C

Jornada; XXVII Jornadas Argentinas de Microbiología; 2017

El extracto de (PGe) ha sido ampliamente utilizado como tratamiento de diferentes afecciones tanto en animales como humanos. es el patógeno más frecuentemente aislado de infecciones intramamarias (IIM) en bovinos, así como el más difundido en los rodeos lecheros de Argentina. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de PGe sobre la internalización de dos cepas de en una línea de células epiteliales mamarias bovinas (MAC-T) y sobre la actividad fagocítica de macrófagos aislados de secreciones mamarias. Se realizaron ensayos de viabilidad celular de MAC-T y macrófagos expuestos a diferentes concentraciones de PGe durante 24hs. En los ensayos de internalización, las MAC-T fueron cultivadas con PGe (0, 0,5, 1 y 3mg/ml) durante 24hs y luego infectadas con las cepas de Newbould 305 (ATCC 29740) y la cepa 5011 (aislada de un bovino con IIM subclínica). Posteriormente las MAC-T fueron tratadas con antibiótico y lisadas para recuperar las bacterias internalizadas. Los resultados se expresaron como log10 de UFC/ml recuperadas a partir de la siembra en placa de agar. La población de macrófagos se incubó con 3 mg/ml de PGe durante 24hs, posteriormente se enfrentó con una suspensión de ambas cepas de marcada con isotiocianato de fluoresceína y se analizó por citometría de flujo el porcentaje de macrófagos capaces de fagocitar al menos una bacteria y el número de bacterias fagocitadas por célula (intensidad de fluorescencia media-IFM). La activación de los macrófagos se determinó mediante la cuantificación de la producción de óxido nítrico (ON). Ninguna de las dosis de PGe evaluadas provocó efectos citotóxicos sobre las MAC-T y los macrófagos. La concentración de 3 mg/ml provocó una disminución en la internalización de la cepa Newbould en MAC-T en relación a las otras concentraciones de PGe y al control (p0,05). En base a los resultados, se puede concluir que PGe redujo la internalización de dos cepas de en MAC-T, pero no modificó la capacidad fagocítica de macrófagos bovinos aislados de secreción mamaria. Nuevos estudios son necesarios para dilucidar el mecanismo por el cual PGe reduce la internalización de , incluyendo el estudio de factores asociados a la interacción temprana del patógeno con las células mamarias bovinas. Esta información podría ser relevante en el desarrollo de nuevos productos para la prevención y/o tratamiento de IIM causadas por .