Aislamiento y caracterización de exosomas de distintas fuentes como posibles nanocarriers de aTF al Sistema Nervioso Central

MATTERA VS.; GLISONI RJ.; PASQUINI JM.; CORREALE JD.

Quilmes

Jornada; 3º Reunion de Jovenes Investigadores de Ciencia y Tecnologia; 2018

UNQ

Resultados previos de nuestro laboratorio demuestran el efecto pro-diferenciante de la apotransferrina (aTF) sobre la célula oligodendroglial, observada tanto in vivo como in vitro. Por otro lado, el efecto remielinizante de la aTf fue demostrado en el modelo animal de desmielinización inducido por cuprizona, en un modelo de hipomielinización inducido por la deficiencia de hierro y en un modelo de Hipoxia/Isquemia (H/I). En este mismo modelo, hemos observado que la administración intranasal (iN) de aTf humana a un animal neonato provee neuroprotección al cerebro. Los resultados muestran que la aTf (aunque en baja cantidad) llegó exitosamente al cerebro del ratón al que se le había inducido la H/I, siendo detectada en el bulbo olfatorio, el lóbulo frontal y el cerebro posterior. El tratamiento redujo el daño de la sustancia blanca, la pérdida neuronal y la astrogliosis en diferentes regiones del cerebro, aumentando la proliferación y supervivencia de los progenitores oligodendrogliales en la zona subventricular y en el cuerpo calloso. Estos datos previos nos indujeron a proponer el desarrollo de una técnica menos invasiva y capaz de administrar aTf al SNC de forma controlada y utilizando la administración iN. Para ello proponemos aislar exosomas cargados de aTf para ser adminsitrados intranasalmente. En esta primera parte del proyecto, se aislaron exosomas provenientes de plasma humano, plasma de ratón, líneas celulares de neuroblastoma (N2a), oligodendroglioma (OLN-93) y cultivo primario de astrocitos. Una vez aislados, se procedió a determinar su calidad, cantidad e integridad a través de Western Blot, Dynamic Light Scattering (DLS) y Microscopía electrónica de Barrido (SEM) concluyendo que las nanopartículas fueron aisladas de manera pura y sin modificaciones en su integridad, siendo las mismas adecuadas para ser cargadas.