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INMUNOEXPRESIÓN DE IL-17 ENGLÁNDULA MAMARIA BOVINA INFECTADA POR STAPHYLOCOCCUSAUREUS DURANTE LA INVOLUCIÓNIMMUNOEXPRESSIONOF IL-17 IN BOVINE MAMMARY GLAND INFECTED WITH STAPHYLOCOCCUS AUREUS DURING INVOLUTION. AndreottiCS1, Pereyra EA1, Sacco SC1, Baravalle C1, Renna MS1, Ortega H1, Calvinho LF2,3, Dallard BE11Laboratorio de Biología Celular y MolecularAplicada, Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral (ICIVET-Litoral),Universidad Nacional del Litoral (UNL)/Consejo Nacional de InvestigacionesCientíficas y Tecnológicas (CONICET), Esperanza, Santa Fe, Argentina. 2Estación Experimental Agropecuaria Rafaela,Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Rafaela, Santa Fe,Argentina. 3Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacionaldel Litoral, Esperanza, Santa Fe, Argentina.csandreotti@yahoo.com.ar Durantela involución temprana de la glándula mamaria (GM) bovina aumenta el riesgo de infeccionesintramamarias (IIM). La mastitis bovina, es reconocida mundialmente como laenfermedad más costosa del ganado lechero, ocasionando graves daños al tejidomamario. Staphylococcus aureus es unpatógeno mayor de la GM que causa principalmente mastitis subclínicas ycrónicas que no responden habitualmente a la terapia antibiótica.1 Seha demostrado que durante los estadios tempranos de la infección por S. aureus, células del sistema inmuneinnato del hospedador, como los macrófagos, producen citoquinasproinflamatorias como interleuquina-1 (IL-1), IL-6, IL-12 p70, IL-18 y factorde necrosis tumoral-alfa (TNF-α).2 La IL-17 es un citoquinamultifuncional que induce la expresión de quimioquinas, citoquinas proinflamatorias y metaloproteasas, y de este modo la estimulación de lainflamación y la quimiotaxis de neutrófilos al sitio de infección.4 Sibien se ha demostrado que la IL-17 juega un rol fundamental en las defensas delhospedador contra infecciones tanto bacterianas como fúngicas, en diferentessitios epiteliales, su rol en las defensas de la GM bovina no ha sidocompletamente esclarecido.3 El objetivo del trabajo fue evaluar la inmunoexpresiónde la IL-17 en cuartos mamarios sanos en relación a infectados crónicos por S. aureus durante la involución activa dela GM bovina. Se utilizaron vacas Holstein no preñadas, en la etapa final de lalactancia. Se obtuvieron muestras de tejido mamario a los 7, 14 y 21 días luegodel último ordeño. Muestras provenientes de cuartos sanos (n=8) e infectadoscrónicos por S. aureus (n=8) fueron incluidasen cada grupo (7, 14 y 21 días). Los tejidos fueron procesados según técnicashistológicas de rutina e incluidos en parafina. Para evaluar la expresión deIL-17 se realizó inmunohistoquímica utilizandoel anticuerpo primario anti-IL-17 (ab79056, Abcam) y el sistema de reveladoestreptavidina-peroxidasa-DAB. Para la cuantificación se empleó el sistema Image-ProPlus 3.0.1 (Media Cybernetic). Para el análisis estadístico de los datos seutilizó ANOVA factorial que evalúa los efectos de la IIM, del tiempo y lainteracción. La inmunomarcación de IL-17 fue positiva a nivel del parénquima,en el citoplasma de las células epiteliales que revisten los alvéolos mamarios y de los conductos deexcreción tanto en cuartos mamarios infectados por S. aureus como en sanos. En el tejido conjuntivo interalveolar eintelobulillar se observaron células del sistema inmune como macrófagos,linfocitos y neutrófilos reactivos a la inmunomarcación. La marcación de IL-17 se vio influenciada por el tiempo de la involución(p=0,02), por el proceso infeccioso (p< 0,001), al mismo tiempo que seobservó interacción entre ambos factores evaluados (p=0, 001). Se observó queel área inmunopositiva para esta citoquina fue mayor en cuartos infectados conrespecto a los cuartos sanos al día 14 (p=0,01) y 21 (p<0,001) de lainvolución, mientras que al día 7 no se observaron diferencias entre cuartosinfectados y sanos (p=0,96). Los resultados obtenidos demuestran la implicanciade esta citoquina en las IIM por S.aureus en bovinos indicando que podrían jugar un rol en la patogenia de lainfección crónica por este patógeno. Asimismo la inmunomarcación observada encomponentes del parénquima mamario y en células inmunes en tejido mamario decuartos no infectados, podría sugerir un rol de esta citoquina en laremodelación de la GM bovina durante el periodo de involución activa. Estosresultados constituyen un fuerte incentivo para identificar y caracterizar lascélulas responsables de la producción de IL-17 en GM bovina y determinar lacontribución de esta citoquina a las defensas contra las IIM causadas por S. aureus. 1 Akers RM, Nickerson SC.2011. Mastitis and its Impact on Structure and Function in the Ruminant MammaryGland. J Mammary Gland Biol Neoplasia. 6:275-289.2 Buzás K, Megyeri K, Hõgye M, Csanády M, Bogáts G, Mándi Y. 2004. Comparativestudy of the roles of cytokines and apoptosis in dilated and hypertrophiccardiomyopathies. Eur Cytokine Netw. 15:53-59.3 Porcherie A, Gilbert FB, Germon P, Cunha P, TrotereauA, Rossignol C, Winter N, Berthon P, Rainard P. 2016. IL-17A is an importanteffector of the immune response of the mammary gland to Escherichia coli Infection. J Immunol. 196:803-812.4 Strzępa A, Szczepanik M. 2011. IL-17-expressing cellsas a potential therapeutic target for treatment of immunological disorders.Pharmacol Rep. 63:30-44.

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