Biocontrol de Xanthomonas axonopodis pv vesicatoria a través de bacteriocinas producidas por Pseudomonas

ANALÍA PRÍNCIPE; MILENKA TORASSO; AGUSTINA GODINO; MARICRUZ FERNANDEZ; SONIA FISCHER

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental (CAMAYA); 2015

La mancha bacteriana, causada por Xanthomonas axonopodis pv vesicatoria, es una de lasenfermedades más importantes del cultivo de tomate, la cual provoca significativas reducciones delrendimiento y de la calidad de los frutos. El objetivo principal de este trabajo fue determinar lacapacidad antagónica de una bacteriocina tipo fago (piocina R) producida por Pseudomonasfluorescens SF4c contra X. axonopodis pv vesicatoria (Xcv Bv5?4a). Una ventaja que presentan lasbacteriocinas es que no tienen efectos tóxicos en animales y humanos a diferencia de losbactericidas comerciales formulados principalmente a base de cobre; los cuales generanfrecuentemente la aparición de cepas tolerantes además de producir un impacto negativo sobre elmedio ambiente y la salud humana.Para evaluar el antagonismo in vitro, se llevó a cabo un ensayo de inhibición de Xcv Bv5?4a enplaca empleando diferentes concentraciones de bacteriocina. La suceptibilidad del biofilm formadopor Xcv Bv5?4a, a la piocina fue analizada en medio mínimo XVM2 empleando cristal violeta parala cuantificación. Ensayos de biocontrol in vivo: La supervivencia de Xcv Bv5?4a fue determinadaen hojas de tomate pulverizadas con diferentes concentraciones de bacteriocinas: 700 y 1500UA/ml. La infección fue realizada empleando una suspensión de Xcv Bv5?4a conteniendoaproximadamente 106 UFC/ml. El número de células viables/cm2 fue determinado a los 7 días postinfección.Los resultados fueron comparados a los controles empleados. Los ensayos fueronrepetidos tres veces y analizados estadísticamente empleando el análisis de varianza de una vía(ANOVA) (p0,05).En condiciones in vitro, las células de Xcv Bv5-4a fueron suceptibles a concentraciones de 500UA/ml de bacteriocina. Además esta piocina fue activa sobre el biofilm formado por Xcv Bv5-4aobservando una disrupción significativa del mismo (60%) (p0,05).A partir de los ensayos in vivo se observó una reducción significativa de los síntomas de la manchabacteriana en las hojas de plantas de tomate tratadas con la bacteriocina (1500 UA/ml). Estosresultados coincidieron con una disminución en el número de células viables de Xcv Bv5?4a (105UFC/ml) comparado con las plantas infectadas empleadas como control (107 UFC/ml) (p≤0,05).Las hojas de estas plantas presentaron además, el desarrollo de lesiones típicas de la manchabacteriana. El tratamiento más efectivo se obtuvo a partir de dos aplicaciones foliares debacteriocinas post-infección (48 y 96 hs).Nuestros resultados indican que el empleo de las bacteriocinas tipo fago, como estrategia alternativapara el control del fitopatógeno X. axonopodis pv vesicatoria, podría reducir los síntomas de lamancha bacteriana en plantas de tomate. La información derivada de estos estudios nos permitirádesarrollar un producto efectivo para controlar algunas de las enfermedades que afectan su cultivo,contribuyendo así a la inocuidad de los productos derivados del mismo.