Mecanismo de acción de la bacteriocina producida por Pseudomonas fluorescens SF4c

MARICRUZ FERNANDEZ; AGUSTINA GODINO; GUSTAVO MORALES; SONIA FISCHER

Río Cuarto

Encuentro; VI encuentro de Física y química de superficies; 2014

Las bacteriocinas son consideradas la nueva generación de compuestos antimicrobianos; en el género Pseudomonas han sido estudiadas principalmente en P. aeruginosa, y denominadas piocinas; éstas han sido clasificadas en 3 grupos (R, F y S) en base a su estructura (Michel-Briand y Baysse et al., 2002).P. fluorescens SF4c es una cepa nativa promotora del crecimiento de trigo y tomate que sintetiza una bacteriocina capaz de inhibir a cepas fitopatógenas de los géneros Pseudomonas y Xanthomonas. Este compuesto antimicrobiano pertenece al grupo de piocina tipo R similar a la de P. aeruginosa (Fischer et al., 2012). La actividad antimicrobiana de las piocinas R de P. aeruginosa consiste en la formación de poros en la membrana de la cepa sensible (Michel-Briand y Baysse et al., 2002). El objetivo de este trabajo fue dilucidar si éste es el modo de acción de la piocina de la cepa SF4c. Este estudio se llevó a cabo mediante microscopia de fuerza atómica (AFM), por ser una técnica muy útil para determinar cambios en la morfología y propiedades mecánicas sufridas ante estímulos externos. Para ello, un cultivo de Xanthomonas axonopodis pv vesicatoria Xcv Bv5?4a fue crecido hasta fase exponencial (DO600 0,5), cosechado y lavado con solución fisiológica y resuspendido en el volumen inicial de cultivo, para luego inmovilizar las bacterias sobre vidrio cubierto por una película de polielectrolito (Morris, 2010 y Braga y Ricci, 2011). Finalmente, sobre las bacterias inmovilizadas se realizó el tratamiento con la bacteriocina (la cual se encuentra resuspendida en buffer TN50). Como control se utilizó bacterias inmovilizadas con el agregado de buffer TN50 sin bacteriocina.Los resultados obtenidos confirman que el modo mediante el cual esta bacteriocina ejerce su acción antimicrobiana es la formación de poros en la membrana de la cepa sensible, observándose una marcada disminución de la altura de las células; lo que sugiere una reducción del volumen celular por pérdida de sustancias intracelulares.