PUESTA A PUNTO DE MICROSATÉLITES ANCLADOS (ISSRS) EN LIPPIA INTEGRIFOLIA (GRIS.) HIER (INCAYUYO)

IANNICELLI, JESICA; PÉREZ DE LA TORRE, MARIANA; PACHECO, MARÍA GABRIELA; ESCANDÓN, ALEJANDRO SALVIO

Mar del Plata

Simposio; VIII Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología - REDBIO 2013; 2013

REDBIO

Los marcadores moleculares basados en la técnica de PCR han demostrado ser herramientas poderosas para estimar la diversidad genética y su distribución en las poblaciones naturales. En base a trabajos previos, y con el objeto de caracterizar genéticamente la colección de incayuyos del INTA, se probaron 13 iniciadores en individuos de diferentes poblaciones con las siguientes condiciones para las reacciones de PCR: 30 ng de ADN molde, 2,5 µl de buffer de reacción 10X; 0,2 mM de dNTPs; 0,8 µM de iniciadores y 0,5 U de Taq polimerasa; para cada iniciador se utilizó su correspondiente concentración de MgCl2. Volumen final 25 µl. Las condiciones de ciclado fueron: (A) desnaturalización inicial de 10 min. a 94°C, (B) 40 ciclos de: 40 seg. a 94°C, 45 seg. a la temperatura óptima para cada iniciador y (C) extensión final por 10 min. a 72°C. Los productos de PCR se corrieron en geles de agarosa al 2% en TAE 1X, teñidos en bromuro de etidio (0,05%). Se obtuvieron los perfiles de los individuos de las diferentes poblaciones analizados hasta el momento mostrando bandas mono y polimórficas, lo que permitirá iniciar estudios para la caracterización genética aplicados a esta especie.