CARACTERIZACIÓN DE UN MARCADOR PARA AMPLIFICACIÓN DE SEÑAL ELECTROANALÍTICA

FARIAS MARCOS E.; LUNA M ALEJANDRA; N. MARIANO CORREA; ANA M. NIEBYLSKI; MOLINA PATRICIA G

Rio Cuarto

Congreso; 9°Congreso Argentino de Química Analítica; 2017

Asociacion Argentina de Químicos Analíticos

Introducción: Las vesículas ofrecen grandes posibilidades para el aumento de la sensibilidad en el desarrollo biosensores, debido a su capacidad para encapsular diferentes agentes y la posibilidad de ser modificadas con bioreceptores que les permiten reconocer una gran cantidad de analitos . Sin embargo, estos sistemas pueden ser inestables y perder el agente encapsulado cuando se encuentran en dispersión acuosa durante un largo plazo; siendo la liofilización una alternativa para prolongar su vida útil. En este trabajo se estudió la respuesta electroquímica de ferrocianuro de potasio (K4(CN)6Fe) encapsulado en vesículas unilaminares grandes (VUG) de 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (DOPC)/ácido palmítico, luego de su ruptura, que fueron previamente liofilizadas utilizando colesterol y sacarosa como lioprotectores.Resultados y conclusiones: Las VUG con K4(CN)6Fe se formaron a través del método de extrusión y se caracterizaron mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM). Se encontró que las VUG liofilizadas eran similares en forma y tamaño a las VUG que no fueron liofilizadas. Luego de la lisis de las VUG con Tx-100, se estudió la respuesta electroquímica en solución, variando su concentración y midiendo la corriente detectada, mediante voltametría de onda cuadrada (VOC). Se observó una variación de la corriente en relación a la concentración de VUG inicial, con un coeficiente de regresión R-Sq=0.993. Esto demostró que este sistema puede liofilizarse y mantener su respuesta electroquímica en función de la concentración. Se estudió también la respuesta electroquímica cuando estas VUG fueron inmovilizadas sobre un electrodo de oro. Se observó mediante VOC y espectroscopia de impedancia, que el tiempo en el que se depositan las VUG sobre el electrodo y alcanzan un equilibrio es, para una dilución de VUG 1:5, aproximadamente 15 minutos. Luego se varió el porcentaje de VUG inmovilizadas con y sin K4(CN)6Fe encapsulado, y se vio que la corriente luego de su lisis variaba de manera directamente proporcional al porcentaje de VUG con K4(CN)6Fe (R-Sq= 0.997) e inversamente proporcional al porcentaje de VUG sin K4(CN)6Fe. Esto indica que este sistema de VGU de DOPC/colesterol/ácido palmítico + sacarosa con K4(CN)6Fe encapsulado puede ser utilizado como marcador de proteínas para el desarrollo de biosensores electroquímicos a través de un método competitivo, pudiendo ser liofilizadas para aumentar su estabilidad en el tiempo.