Inoculación oral en abejas: modificación de la técnica de Rinderer

MARTÍN P. PORRINI; MARTÍN J. EGUARAS

Mar del Plata

Congreso; 34º Congreso de la AAPA.1° Joint meeting ASAS-AAPA; 2011

Asociación Argentina de Producción Animal

Inoculación oral en abejas: modificación de la técnica de Rinderer. Porrini, M. P.*, Eguaras, M. J. Laboratorio de artrópodos, UNMdP. CONICET. *mporrini@mdp.edu.ar Oral inoculation of bees: modifications from Rinderer’s technique La experimentación in vivo en el laboratorio presupone la minimización del estrés inducido en los individuos manipulados. Actualmente la inoculación individual de sustancias y/o propágulos infectivos a individuos de Apis mellifera es engorrosa. Las técnicas generalmente conllevan tiempos prolongados de manipulación, numerosos operadores, utilización de anestésicos y la ingestión forzada del inóculo. En 1976, Thomas E. Rinderer publicó una técnica que fue poco aplicada en protocolos de trabajo. La misma incorpora un dispositivo de madera con perforaciones, donde encastran cilindros de vidrio que, al ser obturados por un tapón de corcho, delimitan un habitáculo donde se confina al individuo. El tapón posee un orificio donde se inserta un capilar de vidrio previamente cargado. El alimento y la fototaxia, son los principales estímulos del consumo. Nuestro objetivo fue implementar nuevos materiales y pasos en la secuencia de trabajo, buscando agilizar la técnica y reducir su costo. La modificación reemplaza los materiales de vidrio por plásticos. Los capilares se reemplazaron por tips de micropipeta cuya punta ha sido truncada para aumentar el diámetro del orificio y permitir el ingreso de la glosa. Los cilindros que delimitan las paredes de la cápsula se confeccionaron con caño rígido de PVC utilizado en instalaciones eléctricas (D=16mm x H=2 cm). La base donde encastran los cilindros se elaboró con una plancha de espuma de polietileno, disponible comercialmente como aislante térmico (0,5 cm), perforada con un sacabocado del diámetro del cilindro y adherida (con adhesivo de contacto) a una plancha de madera (fibrofácil). El corcho se reemplazó por el círculo de espuma de polietileno sobrante del sacabocado, perforado en el centro para el paso del tip. Se sugiere la siguiente secuencia de trabajo: utilizar obreras con un mínimo de 48hs de emergidas; hambrear a los individuos un mínimo de 1,5 hs; preparar la batería de cilindros encastrados en las planchas y por otro lado los tips atravesando los tapones; cargar los tips con la solución azucarada (2-10µl); enfriar a los individuos en heladera (15-20 min); confinar a las abejas cerrando el habitáculo con tapón+tip; colocar las planchas con abejas en incubadora iluminada; Retirar del dispositivo las que consumieron la totalidad del inóculo y descartar las restantes (20-40 min); desmontar el dispositivo y lavar/desinfectar, para ello, puede usarse temperatura hasta 70°C (testeado durante 72hs), solución de hipoclorito de sodio o detergentes sin dañar el material. La metodología se ha aplicado en repetidas ocasiones, trabajando con 3 operarios, realizándose infecciones con Nosema ceranae de hasta 600 individuos en el lapso de 3 a 5 hs dependiendo de la edad de las obreras, tiempo de hambreado y sustancia administrada. Palabras clave: Apis mellifera, experimentación in vivo, administración individual Key words: Apis mellifera, in vivo assays, individual feeding