Una alternativa simple y económica para el inmunodiagnóstico: optimización de las condiciones de marcación de inmunoglobulinas con colorantes triazínicos

ELIANA CELA; DANIEL H. GONZÁLEZ MAGLIO; MARIELA L. PAZ; FEDERICO S. WEILL; JULIANA LEONI; ALEJANDRO FERRARI

Rosario, Argentina

Congreso; II Jornada de la Asociación de Inmunología Veterinaria; 2009

Los ensayos inmunodiagnósticos utilizan anticuerpos marcados con enzimas, fluorocromos, ligandos radiactivos u oro coloidal. Esta última constituye la única forma de marcación utilizada en las técnicas rápidas, como el dot blot y la inmunocromatografía. Sin embargo, a pesar de su versatilidad, esta marcación resulta demasiado costosa. Considerando la creciente necesidad de métodos inmunodiagnósticos rápidos, que sean económicos y se adapten a las necesidades del ámbito veterinario de nuestro país, en este trabajo se evaluó la marcación de anticuerpos con un colorante triazínico (Red-H3-B). La marcación se realizó sobre inmunoglobulinas totales anti E. coli, y se evaluaron tres tiempos de incubación (30, 60 y 120 minutos) y tres pH de reacción (8.25, 9.0 y 10.2). Para cada condición, se estudió el grado de marcación por espectrofotometría, el título por ELISA y la intensidad del color en un ensayo de dot blot. Los resultados mostraron que la marcación a pH 10.2 durante 120 min conduce a una mayor relación colorante:Ig. A pesar de que en estas condiciones se produce una leve disminución del título por ELISA, la intensidad de la coloración por dot blot, es máxima y adecuada para los fines propuestos. Se concluye que la marcación de anticuerpos con colorantes triazínicos resulta una alternativa viable –económica y sencilla– para la obtención de reactivos de enorme utilidad en el diseño de técnicas rápidas de inmunodiagnóstico. Estos ensayos resultarían de enorme utilidad en el ámbito de la inmunología veterinaria, ya que podrían utilizarse sin necesidad del equipamiento complejo de un laboratorio de diagnóstico.