HCG y cAMP regulan la expresión de leptina en células trofoblásticas

J MAYMÓ; JC CALVO; C VARONE

IBYME Buenos Aires, Argentina

Jornada; VIII Jornadas Multidisciplinarias de la Sociedad Argentina de Biología (SAB); 2006

Sociedad Argentina de Biología (SAB)

La leptina es una hormona proteica de 16KDa descubierta en tejido adiposo con la función de determinar el balance energético del organismo. La expresión de leptina y sus receptores se evidenció también en placenta, pudiendo tener efectos sobre el crecimiento, la angiogénesis y la inmunomodulación, afectando funciones maternas y fetales, por mecanismos autócrinos y parácrinos. Resultados de nuestro grupo demostraron que en células trofoblásticas JEG-3 y BeWo, el promotor de leptina es activo, con elementos específicos responsables de regular su actividad basal. Por otro lado observamos que el tratamiento con estradiol 0.1μM o hCG 10-100UI/ml, presenta un efecto inductor sobre la transcripción de la proteína. El objetivo del presente trabajo es estudiar los mecanismos regulatorios involucrados en la expresión de leptina por hCG, utilizando como modelo la línea BeWo. Se realizaron ensayos de Western blot y de gen reportero en experimentos de transfección transitoria, con plásmidos conteniendo deleciones seriadas del promotor del gen de leptina. Observamos una estimulación en la expresión de leptina por hCG de hasta 5 veces, en todas las regiones promotoras analizadas. Mediante un análisis in sílico del promotor hallamos posibles elementos regulados a través de la vía de señalización por AMPc. Por Western blot observamos que AMPc 1μM es capaz de estimular la expresión de leptina mientras que a concentración 1mM inhibe dicha expresión. Resultados similares se observaron a nivel transcripcional mediante ensayos de gen reportero. Más aún, determinamos que AMPc 1mM inhibe la activación del promotor ejercida por hCG 100UI/ml. Finalmente analizamos la vía de señalización de las MAPK. El tratamiento con PD98059 50μM (inhibidor específico de MEK) inhibe la inducción en la expresión de leptina mediada por hCG. Los resultados obtenidos aumentan la comprensión de los mecanismos regulatorios de la expresión de leptina en trofoblastos humanos por hCG y AMPc.