Sam68 participa en la proliferación celular, crecimiento y supervivencia mediados por leptina de células JEG3

FLORA SANCHEZ-JIMENEZ; ANTONIO PÉREZ-PÉREZ; ANTONIO CARMONA-FERNANDEZ; CARMEN GONZALEZ YANES; YÉSICA GAMBINO; JULIETA MAYMÓ; CECILIA VARONE; VÍCTOR SÁNCHEZ MARGALET

Cordoba

Congreso; XXXIII Congreso de la Sociedad española de Bioquímica y Biología Molecular.; 2010

SEBBM

Sam68 participa en la proliferación celular, crecimiento y supervivencia mediados por leptina de células JEG3 Flora Sánchez Jiménez, Antonio Pérez Pérez, Antonio M. Carmona-Fernández, Carmen González-Yanes, Yésica Gambino, Julieta Maymó, Cecilia Varone, Víctor Sánchez-Margalet Hosp. Univ. V. Macarena. Sevilla Introducción: La leptina es una hormona proteica de 16 KDa conocida por su función fisiológica primaria de regular la masa corporal a través de sus efectos sobre la ingesta y el consumo energético. No obstante, también se le ha atribuido un papel clave en la función reproductiva, donde de forma particular, resulta esencial en el desarrollo embrionario y de la placenta, que es la principal fuente de leptina durante el embarazo. Presenta importantes acciones biológicas en este sentido, relacionadas con la regulación del crecimiento celular y la proliferación, así como un efecto antiapoptótico; todas ellas, funciones demostradas previamente en diferentes sistemas biológicos y celulares, como las células trofoblásticas JEG-3. Sam68 es una proteína adaptadora que participa en la transducción de la señal de la leptina, donde diferentes trabajos le han atribuido un papel interaccionando con diferentes proteínas señalizadoras en las vías STAT-3, MAPK y PI3K, que median estos efectos biológicos de la leptina. Objetivos: Nos propusimos determinar el papel de la proteína Sam68 en la proliferación, crecimiento celular y efecto antiapoptótico mediados por la leptina. Materiales y métodos: Se utilizó la línea celular JEG-3, derivada de trofoblasto placentario, y una estrategia antisentido para inhibir la expresión de Sam68. Tras estímulo posterior con leptina, se realizaron tres abordajes diferentes para determinar la proliferación y crecimiento celular: un recuento de células, la cuantificación de la incorporación de timidina tritiada a la síntesis de ADN y la de leucina tritiada a la síntesis proteica. Tras inducir apoptosis por depleción de suero, se determinó además el efecto antiapoptótico de la leptina estudiando por citometría de flujo su efecto sobre la translocación del fosfolípido fosfatidilserina al exterior de la membrana plasmática. Resultados: En las células transfectadas con el antisentido de Sam68 y estimuladas con leptina, no tuvo lugar el efecto proliferativo de esta hormona al comparar con las células control (p<0,01), como se observó en los tres experimentos de proliferación y crecimiento celular. El efecto antiapoptótico de la leptina se vio asimismo impedido en las células donde inhibimos la expresión de Sam68 con respecto a los controles (p<0,01), desarrollándose un efecto apoptótico adicional ante ausencia de esta proteína. Conclusiones: En células de placenta, la proteína Sam68 participa en los efectos biológicos de la leptina, como son su efecto proliferativo, de crecimiento celular y antiapoptótico. Aunque desconocemos el papel concreto de esta proteína en la señalización de la leptina, es probable que sea dependiente de la interacción con proteínas de las vías de transducción de la señal de esta hormona. Así, Sam68 resultaría esencial para las ya reconocidas funciones de la leptina en diferentes procesos del desarrollo embrionario.