Efecto del ácido hialurónico de alto y bajo peso molecular sobre la viabilidad celular de astrocitos murinos in vitro.

ROCÍO ALEJANDRA FERNÁNDES; ALEJANDRO DAVID MORONI; MARÍA MICAELA CASTRO; DAIANA VITALE; LAURA DANIELA ALANIZ; MARÍA LAURA PALUMBO

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Congreso; Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental.; 2020

Asociación Argentina de Farmacología Experimental

Los astrocitos, células gliales presentes en el sistema nervioso central (SNC), constituyen entre el 20-40% del total de células del cerebro humano. Los astrocitos participan de las sinapsis, nutren a las neuronas, evitan la excitotoxicidad por glutamato, entre otras. Por otro lado, el ácido hialurónico (HA) es el componente principal de la matriz extracelular del cerebro. Distintos tipos celulares responden diferente ante la presencia de HA de bajo (LMW) y alto (HMW) peso molecular. El objetivo de este trabajo fue poner a punto el cultivo enriquecido de astrocitos de ratones para luego realizar tratamientos con HA de LMW y HMW, con el fin de determinar las dosis que no afectan su viabilidad celular. En estudios futuros se evaluarán la respuesta de los astrocitos al HA y su mecanismo, por encontrarse el HA alterado en algunas patologías del SNC. Los cultivos se realizaron con cortezas cerebrales de ratones BALB/c postnatales de 0-3 días. Las células fueron cultivadas en medio DMEM/F-12 con pen/estrep (50 U/ml, 50 µg/ml) y 10% de SFB a 37 °C y 5% CO2 durante 14 días. Se renovó el medio cada 3 días hasta su confluencia. Los astrocitos se separaron de otras células mediante 3 agitaciones a 180 rpm por 24 hs, dejando descansar 24 hs entre cada una en estufa a 37 °C y 5% CO2. Para el ensayo de viabilidad celular, los astrocitos fueron tratados con HA de LMW y HMW a concentraciones (cc) de 20, 100 o 1000 ug/ml por 24 hs. La viabilidad celular se cuantificó por la técnica de MTS. Los resultados indicaron que al tratar los astrocitos con 20, 100 y 1000 ug/ml de HA LMW, la viabilidad estuvo comprendida en un rango de 65 a 72%; mientras que al tratarlos con HA HMW se observó una viabilidad del 82, 55 y 62 % respectivamente. Concluimos que los astrocitos presentan menor supervivencia a cc más bajas de HA LMW y a cc más altas de HA HMW. Evaluar otras dosis de HA y a distintos tiempos son necesarios para precisar las condiciones que no afecten la viabilidad de los astrocitos.