Neuronal Differenciation involves high molecular immunophilins ying-yang

HR QUINTÁ, MD GALIGNIANA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion clinica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

Las inmunofilinas (IMMs) existen en complejos con hsp90 y p23, siendo además receptores intracelulares de drogas inmunosupresoras tales como FK506. Observamos que la activación de la IMM FKBP52 con FK506 favorece la diferenciación de células N2a hacia un fenotipo neuronal. Ensayos comparativos entre dBcAMP (un agente diferenciador estándar), IBMX (inhibidor de fosfodiesterasas), ciclosporina A (ligando de la otra familia de IMMs, las ciclofilinas) y radicicol (inhibidor de hsp90), demostraron que FK506 tuvo el máximo efecto sobre el largo promedio de las neuritas generadas por el tratamiento (mayor a 120 μm), aún por sobre el de dBcAMP (~80 μm). Ciclosporina A mostró efectos tóxicos y radicicol un efecto subóptimo (~50 μm). Western blots evidenciaron la inducción de marcadores de diferenciación neuronal típicos (Map-2, Tau y BIII-Tubulina) así como de hps90, FKBP52 y p23, mientras que los niveles de la IMM FKBP51 no se modificaron. Por microscopía confocal observamos que, tanto en células N2a indiferenciadas como en cultivos primarios de embrión de rata, hsp90, FKBP52 y p23 co-localizan en forma de anillo perinuclear. Al inducirse la diferenciación, tal anillo se desensambló, siendo hsp90 y FKBP52 las que migraron en primer lugar al citoplasma, concentrándose FKBP52 en los conos de ramificación y crecimiento rodeada por hsp90. Simultáneamente, FKBP51 tomó el lugar de FKBP52 en el anillo perinuclear. FKBP52 colocalizó mayoritariamente con Tau en los axones, los que fueron más largos que los de neuronas no tratadas con FK506. Cuando se sobreexpresó a FKBP52 ó se hizo el knock-down de FKBP51, la cinética de diferenciación fue mayor. El knock-down de FKBP52 desfavoreció la formación del anillo y la diferenciación, la que también se inhibió por sobre-expresión de FKBP51. Concluimos que durante la diferenciación neuronal se produce un ying-yang entre FKBP52 y FKBP51, IMMs que parecen ser esenciales para dicho fenómeno.