LA FOSFORILACIÓN REGULA LA ESTRUCTURA SECUNDARIA EN COMPLEJOS DE P53 Y TAZ2

ITHURALDE, RE; TURJANSKI, AG

Córdoba

Workshop; 1er Workshop Argentino de Biofísicoquímica de Proteína; 2011

Sociedad Argentina de Investigación en Fisicoquímica (saifq)

Introducción: las proteínas nativamente desestructuradas son un grupo de proteínas que no poseen una estructura tridimensional definida, pero que pueden adquirir una conformación específica cuando interactúan con otras biomacromoléculas(1,2). Dado el reciente interés en estas proteínas y considerando que su caracterización computacional es extremadamente difícil, los métodos de simulación computacional han emergido como una alternativa para responder preguntas básicas acerca de sus funciones (3). En nuestro caso, la unión de p53 al dominio Taz2 de CBP ha sido extensivamente caracterizado en términos de estrutura por distintos métodos experimentales.(1,4,5) Objetivos: Nuestro principal objetivo es entender a nivel molecular el proceso de plegado y unión de estos dos factores de transcripción. En este trabajo, nos enfocamos en caracterizar los distintos estados de fosforilación del complejo entre p53 y Taz2 con simulaciones all-atom. Resultados: Realizamos dinámicas moleculares all-atom del complejo TAD-Taz2 en distintos estados de fosforilacióndel dominio TAD: en su estado no fosforilado, fosforilado en la Serina 15, fosforilado en la Treonina 18 y fosforilado en la Serina 20. Como resultado de dichas dinámicas, hemos podido ver que el core de la interacción se debe a residuos hidrofóbicos en ambos dominios, como se esperaba de trabajos experimentales previos. Sin embargo, hemos podido detectar interacciones de puentes salino y puente hidrógeno importantes para la unión, en especial las realizadas por tres residuos de arginina presentes en el dominio Taz2 (residuos 1731, 1732 y 1737) que a través de diversos estudios se conocía eran importantes para la interacción pero no estaban caracterizados a nivel molecular. El estado de fosforilación influye en la estructura secundaria del dominio TAD, favoreciendo o desfavoreciendo la formación de alfa-hélice alrededor de los residuos 16-26. Se ha caracterizado a su vez a nivel molecular las interacciones que presentan los grupos fosfatos en el complejo, estando en el caso de la Serina 20, muy expuesto al solvente, un poco menos en el caso de la Serina 15, y formando interacciones con residuos básicos del dominio Taz2 y con protones de amida del dominio TAD en el caso de la Treonina 18. Conclusiones: Hemos encontrado nuevos residuos que podrían ser relevantes para el mantenimiento de la interacción entre ambos complejos, una relación entre el estado de fosforilación y la estructura secundaria del dominio TAD que podría ser relevante para la función y caracterizado a nivel molecular las interacciones que forman los fosfatos y un grupo de residuos de arginina del diminio Taz2 en los distintos complejos. Referencias: 1.Dyson HJ & Wright PE., Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 6,197-208 (2005) 2.Tompa P Trends Biochem.Sci., 27,527-533 (2002). 3.Turjanski AG, Vaque JP, & Gutkind JS.,Oncogene , 26,3240-3253 (2007). 4. Wright PE & Dyson HJ., J. Mol. Biol., 293,321-331(1999). 5. Feng H, Jenkins LM, Durell SR, Hayashi R, Mazur SJ, Cherry S, Tropea JE, Miller M, Wlodawer A, Appella E, Bai, Structure,17,202-210 (2008).