Sistema de activación del plasminógeno en ovocitos bovinos madurados in vitro

FERRERO MC; JIMENEZ-DÍAZ M; LLANOS R; MICELI D

San Miguel de Tucumán, Tucumán

Jornada; V Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores "Augusto Palavecino"; 2004

Universidad Nacional de Tucumán, Facultad de Bioquímica, Qca. y Fcia

Sistema de activación del plasminógeno en ovocitos bovinos madurados in vitro Mariana Ferrero, María Jiménez-Díaz, Ricardo Llanos, Dora Miceli Cátedra Biología Celular. INSIBIO – UNT. Chacabuco 461. S. M. de Tucumán. En los folículos ováricos antrales, las células del cúmulo (CCs) permanecen muy compactas hasta el período preovulatorio. El pico de hormona luteinizante induce la expansión del cúmulo y la expulsión del primer cuerpo polar. Existe una estrecha relación entre el grado de expansión de las CCs y los índices de fecundación de ovocitos madurados in vitro (MIV). Se conoce que los Activadores del Plasminógeno participan en la remodelación de los tejidos y son secretados por las CCs durante la expansión. Nosotros demostramos la presencia de Plasminógeno en la superficie de la membrana plasmática y la matriz extracelular (MEC) de las CCs en bovinos. En este trabajo investigamos el efecto de la activación exógena de dicho Plg con estreptoquinasa (SK) y el de un inhibidor de dicha activación, el ácido épsilon amino caproico (EACA) durante la MIV de los complejos cúmulo ovocito (COCs) bovinos. Los COCs obtenidos por aspiración de folículos de ovarios se seleccionaron según criterios morfológicos y se separaron en tres lotes (Control, SK y EACA). Se maduraron en medio TCM-199 con rFSH en estufa gasificada a 38,5°C durante 22 hs. A los lotes SK y EACA se adicionaron SK en concentraciones fisiológicas y EACA 200 mM respectivamente, a las 0 y 11 hs de iniciada la MIV y a las 22 hs se evaluaron la expansión de las CCs y la expulsión del primer cuerpo polar. En presencia de SK se observo una expansión acompañada de una disgregación de las células foliculares periféricas sin modificaciones en el tamaño de los COCs con respecto al lote control mientras que la expansión fue completamente inhibida en presencia de EACA. Interesantemente durante la eliminación de las CCs de los ovocitos mediante hialuronidasa al 4% y mecánicamente se observó que los ovocitos de los lotes control y EACA se desnudaron con dificultad y algunos conservaron las CCs fuertemente adheridas, mientras que los del lote SK se desnudaron totalmente una vez cumplido el tiempo de tratamiento. Esto sugiere que la formación de plasmina, por activación exógena del Plg, actuaría sobre la MEC de las CCs. Se observó además que la presencia del primer cuerpo polar fue mayor en aquellos ovocitos MIV tratados con SK, sugiriendo que la interrupción de la interacción entre el ovocito y CCs mediada por SK induciría el reinicio de la meiosis favoreciendo la MIV