Caracterização de membranas eritrocitárias resistentes a TX-100, Brij 98 e Brij 58

BRUNA R. CASADEI; EDUARDO M. CLOP; PATRÍCIA O. CARVALHO; CLEYTON C. DOMIGUES; MARIA A. PERILLO; ENEIDA DE PAULA

C A Bs As

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

Lipid rafts são domínios membranares enriquecidos em colesterol eesfingolipídios, responsáveis por diversas funções fisiológicas. Nestecontexto, a composição e sua estrutura são particularmente importantes eDRMs (detergent-resistant membrane), que são membranas isoladas após otratamento com detergente não-iônico a 4ºC, tem sido um métodoexperimental extensivamente usado para o estudo de rafts. Neste trabalho,comparamos os resultados obtidos com DRMs de eritrócitos preparadas apartir de TX-100(1) com os resultados de DRMs preparadas a partir de Brij98 e Brij 58, tanto a 4ºC quanto a 37ºC. Todas as DRMs apresentam-seenriquecidas em colesterol, no entanto a analise da composição defosfolipídios por HPTLC demonstrou que as DRMs de Brij são similaresaos ghosts de eritrócitos e somente as DRMs de TX-100 são enriquecidasem esfingomielina, porém possuem baixo conteúdo de fosfatidiletanolaminaem relação às demais DRMs. Análise dos lipídios por cromatografia gasosademonstrou que todas as DRMs apresentaram-se enriquecidas em ácidosgraxos de cadeias longas e saturadas. Na análise por ressonânciaparamagnética eletrônica (EPR) somente as DRMs de TX-100 apresentaramum aumento significativo na organização da bicamada lipídica. Os lipídiosdas DRMs foram injetados em monocamadas de Langmuir para analise daisoterma de pressão na interface ar-água. Os ghosts e as DRMs de TX-100,Brij 98 e Brij 58 apresentaram uma pressão de colapso (c) de 50, 48, 45 e 43mN/m, respectivamente, e em experimento de compressão/descompressãomostraram um marcado comportamento de histereses que se repetiu emciclos sucessivos.