Expresión diferencial de b-esterasas y peroxidasas en callos organogénicos y no organogénicos de Arachis pintoi obtenidos in vitro

MH SOTO OCA; M FALOCI; RICARDO DANIEL MEDINA; LA MROGINSKI

Corrientes, Argentina

Congreso; 8va. Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas de la UNNE; 2003

SGCyT, UNNE

El objetivo de este trabajo fue encontrar marcadores bioquímicos que puedan asociarse a la vía de regeneración organogénica en Arachis pintoi. Los zimogramas muestran que no se encontraron diferencias que puedan asociarse al explante utilizado, ni a las distintas concentraciones de reguladores de crecimiento (ANA y BAP) usadas. El sistema isoenzimático ACP, presentó patrones de bandas bien definidos con isoformas de alto, medio y bajo peso molecular, con actividad uniforme tanto para los callos organogénicos como para los no organogénicos, no pudiéndose asociar ninguna banda al proceso de diferenciación. Los perfiles isoenzimáticos de DIA, MDH y SDH, presentan bandas de peso molecular medio donde se resalta la actividad en los callos organogénicos. Los zimogramas para EST fueron bien definidos, con bandas de peso molecular medio a bajo, pudiéndose encontrar diferencias cuali y cuantitativas entre los callos organogénicos y los no organogénicos. Las diferencias cualitativas se deben a la presencia de tres bandas con Rf 0,59; 0,64 y 0,71 y las diferencias cuantitativas a la mayor intensidad de las bandas obtenidas con los callos organogénicos respecto de los no organogénicos. En el caso de PER, los patrones de bandas también presentaron diferencias cuantitativas con bandas de peso molecular medio a alto, con mayor actividad en callos organogénicos. Se evidenciaron también, para este sistema 2 bandas polimórficas con Rf 0,23 y 0,26 cuya presencia podría asociarse a los callos organogénicos. De todos los sistemas estudiados,EST y PER presentaron diferencias cualitativas entre los callos organogénicos y no organogénicos de Arachis pintoi. Varios autores citan el hallazgo de bandas isoenzimáticas características de tejidos en diferenciación (organogénicos o embriogénicos). Rao et al, 1990, pudieron diferenciar patrones de EST, MDH y PER en callos embriogénicos y no embriogénicos en maíz. Asimismo, Everett et al., 1985, encontraron patrones electroforéticos de EST y Alcohol Deshidrogenasa que permitieron distinguir cultivos embriogénicos de organogénicos en la misma especie. Chibbar et al., 1988, trabajando con zanahoria (Daucus carota L.) encontraron una isoesterasa presente en tejidos embriogénicos y ausente en no embriogénicos. Kochba et al., 1977, determinaron la presencia de una isoperoxidasa particular del callo embriogénico, en naranja (Citrus sinensis (L.) Osb.) y también reportaron diferencias cuantitativas en la actividad de esta isoenzima entre el callo embriogénico y el no embriogénico. De igual forma, Menéndez-Yuffa & García de García, 1996, encontraron diferencias marcadas de actividad en callos embriogénicos y no embriogénicos con los sitemas DIA, MDH y ACP y cuatro bandas en ACP, posiblemente marcadoras, en callos embriogénicos de café, ausente en callos no embriogénicos. Estos estudios sugieren el análisis de otros sistemas isoenzimáticos para conocer la máxima variabilidad genética obtenida entre callos organogénicos y no organogénicos. El sistema isoenzimático ACP, presentó patrones de bandas bien definidos con isoformas de alto, medio y bajo peso molecular, con actividad uniforme tanto para los callos organogénicos como para los no organogénicos, no pudiéndose asociar ninguna banda al proceso de diferenciación. Los perfiles isoenzimáticos de DIA, MDH y SDH, presentan bandas de peso molecular medio donde se resalta la actividad en los callos organogénicos. Los zimogramas para EST fueron bien definidos, con bandas de peso molecular medio a bajo, pudiéndose encontrar diferencias cuali y cuantitativas entre los callos organogénicos y los no organogénicos. Las diferencias cualitativas se deben a la presencia de tres bandas con Rf 0,59; 0,64 y 0,71 y las diferencias cuantitativas a la mayor intensidad de las bandas obtenidas con los callos organogénicos respecto de los no organogénicos. En el caso de PER, los patrones de bandas también presentaron diferencias cuantitativas con bandas de peso molecular medio a alto, con mayor actividad en callos organogénicos. Se evidenciaron también, para este sistema 2 bandas polimórficas con Rf 0,23 y 0,26 cuya presencia podría asociarse a los callos organogénicos. De todos los sistemas estudiados, EST y PER presentaron diferencias cualitativas entre los callos organogénicos y no organogénicos de Arachis pintoi. Varios autores citan el hallazgo de bandas isoenzimáticas características de tejidos en diferenciación (organogénicos o embriogénicos). Rao et al., 1990, pudieron diferenciar patrones de EST, MDH y PER en callos embriogénicos y no embriogénicos en maíz. Asimismo, Everett et al., 1985, encontraron patrones electroforéticos de EST y Alcohol Deshidrogenasa que permitieron distinguir cultivos embriogénicos de organogénicos en la misma especie. Chibbar et al., 1988, trabajando con zanahoria (Daucus carota L.) encontraron una isoesterasa presente en tejidos embriogénicos y ausente en no embriogénicos. Kochba et al., 1977, determinaron la presencia de una isoperoxidasa particular del callo embriogénico, en naranja (Citrus sinensis (L.) Osb.) y también reportaron diferencias cuantitativas en la actividad de esta isoenzima entre el callo embriogénico y el no embriogénico. De igual forma, Menéndez-Yuffa & García de García, 1996, encontraron diferencias marcadas de actividad en callos embriogénicos y no embriogénicos con los sitemas DIA, MDH y ACP y cuatro bandas en ACP, posiblemente marcadoras, en callos embriogénicos de café, ausente en callos no embriogénicos. Estos estudios sugieren el análisis de otros sistemas isoenzimáticos para conocer la máxima variabilidad genética obtenida entre callos organogénicos y no organogénicos.