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La quimotripsina (QT) es una enzima proteolítica que actúa en los sistemas digestivos de los mamíferos y otros organismos. Su PM es 25,7 kDa y su pI de 9,10. Esta enzima es utilizada en la industria agroalimentaria en general, en formulaciones de alimentos infantiles y en el tratamiento de cueros.Recientemente se han desarrollado nuevas metodologías de purificaciónde enzimas que involucran menos pasos que los tradicionales, lo que redunda en un ahorro de tiempo y dinero. Uno de estos métodos es la precipitación de las mismas con polielectrolitos (PE). El objetivo de este trabajo es estudiar la interacción de quimotripsina con tres PE determinando las condiciones de precipitación y redisolución de la enzima de manera de conocer las variables involucradas en el proceso. Los tres PE difieren entre sí en sus características estructurales (acidez y rigidez de la cadena). Se utilizó poliacrilato (PAA),polivinilsulfonato (PVS) y carragenano (Carr). PAA y PVS son PE sintéticos mientras que Carr es un polisacárido natural. PVS y Carr poseen grupos sulfonatos que les confieren carga negativa a cualquier pH, sin embargo, PAA posee grupos ácidos carboxílicos, de manera que su estado de carga es altamente dependiente del pH y la fuerza iónica del medio. Se determinaron los diagramas de fases para quimotripsina con los 3 PE ensayados, es decir, losrangos de pH y concentración de NaCl necesarios para obtener agregados insolubles de QT con los distintos PE. El comportamiento es totalmente diferente en todos los casos. Para el PVS y Carr, existe una sola curva de frontera de fases: por encima de la misma (pH más alcalinos), la mezcla QT-PE es soluble y por debajo de la misma, se da la separación de fases,es decir, la precipitación. Sin embargo, en el caso de PAA, existen dos curvas fronteras defases: por encima de la superior la solución es homogénea, entre ambas, se forma el precipitado QT-PAA y por debajo de la inferior (pH más acidos), precipita PAA pero QT permanece en solución. Este caso es diferente a los anteriores debido a que PAA es un poliácido débil. En todos los casos se observa que el incremento de la fuerza iónica disminuye el valor de pH al cual se da la separación de fases, siendo más marcado el efecto en el caso de la interacción QT-PVS, indicando, probablemente, un mayor carácter electrostático en lainteracción. En el caso de Carr se observa sólo una disminución en el pH de precipitación ante el primer agregado de sal, pero luego no cambia significativamente, probablemente debido a que la conformación del polímero no es afectada por la fuerza iónica dado que se trata de un polisacárido de estructura más rígida que los polímeros sintéticos. Mediante titulaciones deQT con los PE, pudo calcularse que por cada gramo de PVS precipitan 100 g de QT, por cada gramo de Carr, precipitan 20 g de QT y por cada gramo de PAA, 40 g de QT. Estos resultados indican que es necesaria una pequeña cantidad de PE para obtener cantidades considerables de enzima. La velocidad de precipitación es altamente dependiente de la concentración de QT y del pH del medio. Sin embargo, en todos los casos, la cinética es lo suficientemente rápida como para considerar estos PE apropiados para su uso en un proceso de purificación. Todoslos PE ensayados se mostraron eficientes en la precipitación de QT. Se demostró que estos PE pueden ser utilizados como agentes precipitantes de QT en un proceso de recuperación a partir de su fuente natural. La metodología mostró ser eficiente lo que permitiría desarrollar un proceso de purificación de QT.

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