ADSORCIÓN DE PROTEÍNAS MODELO SOBRE MATRICES BIPOLIMÉRICAS NO COMERCIALES

GALANTE MICAELA; WOITOVICH VALETTI NADIA; LOMBARDI JULIA; BOERIS VALERIA; PICÓ GUILLERMO

Rosario

Congreso; XIII Congreso y XXXI Reunión anual de la Sociedad de Biología de Rosario. 2011. Rosario.; 2011

Sociedad de Biología de Rosario

El objetivo de este trabajo es desarrollar matrices de adsorción económicas y biodegradables para ser utilizadas en procesos de purificación de proteínas. Se utilizaron los siguientes polímeros cargados eléctricamente (polielectrolitos): carragenano (Carr), alginato (Alg), chitosán (Chi), Eudragit E100 (EuE) Eudragit L100 (EuL) y polietilenimina (PEI). Los tres primeros son polisacáridos naturales, los tres últimos son sintéticos. Carr, Alg y EuL poseen carga neta negativa debido a la presencia de grupos sulfato (Carr) y carboxilato (Alg y EuL). Chi, EuE y PEI son polibases debido a la presencia de grupos amina en su cadena. Se prepararon mezclas de distintas combinaciones de polianiones con policationes en el rango de pH de 2 a 12. Se determinaron las condiciones en las cuales estas combinaciones forman coacervados, precipitados o resultan solubles. En general, se obtuvieron precipitados o coacervados a pHs ácidos o neutros. El rango resultó más acotado en el caso de la mezclas conteniendo Alg y EuL, debido a que los mismos pierden su carga eléctrica negativa (y su capacidad de precipitar con policationes) a pHs menores a 3. Para cada valor de pH en el cual se obtuvo una matriz insoluble se determinaron las estequiometrías de interacción entre el polianión y el policatión mediante titulaciones turbidimétricas y conductimétricas. Se encontró que la interacción es máxima cuando la cantidad de cargas positivas de los policationes iguala a la cantidad de carga negativa de los polianiones, es decir que la interacción es estequiométrica respecto de la cantidad de cargas. Se ensayó la capacidad adsorptiva de las matrices artesanales obtenidas a pH 6,50 sobre proteínas modelo de distinto punto isoeléctico. Las proteínas seleccionadas fueron albúmina sérica bovina (BSA), quimosina (QM) y quimotripsina (QT). Se encontró que la capacidad adsorptiva era mayor en las matrices formadas exclusivamente por polímeros sintéticos, probablemente debido a la homogeneidad de su composición. Las matrices EuE/EuL resultaron apropiadas para adsorber proteínas ácidas (se adsorbió hasta un 80% de QM), básicas (se adsorbió hasta un 70% de QT) pero no para una proteína levemente ácida como BSA. En conclusión, estas matrices resultaron apropiadas para la retención de proteínas de distintas características.