Biosensor amperométrico basado en la inmovilización de oxalato oxidasa en una matriz mucina/quitosán

T. BENAVIDEZ, R. CAPRA, C. ÁLVAREZ, A. BARUZZI

Salta

Congreso; XVI CONGRESO ARGENTINO DE FISICOQUÍMICA Y QUÍMICA INORGÁNICA; 2009

Asosiación Argentina de Investigación Fisicoquímica

El oxalato, metabolito excretado por el riñón, produce estrés oxidante y muerte de células renales en concentraciones patológicas [1]. Los métodos cromatográficos y espectrofotométricos para determinar oxalato son muy laboriosos, caros y algunos requieren pretratamiento de la muestra [2,3]. A través del desarrollo de biosensores enzimáticos se da solución a estas desventajas debido a la especificidad enzimática, precisión analítica y simplicidad de uso [4,5]. Anteriormente en nuestro laboratorio se desarrolló un biosensor inmovilizando la enzima oxalato oxidasa en una matriz mucina/carbopol [6]. Quitosán es un polímero derivado de la quitina cuya solubilidad y propiedades dependen sustancialmente del pH. En este trabajo se inmovilizó oxalato oxidasa en una matriz de mucina/quitosán con glutaraldehído como entrecruzante. Se estudió el efecto de la relación en peso de mucina/quitosán y de la concentración de glutaraldehído sobre la respuesta del sensor. Una baja respuesta dinámica se observó cuando la oxalato oxidasa fue inmovilizada en una matriz de quitosán 100% con glutaraldehído 5% v/v. La adición de mucina a la matriz de inmovilización mejoró la respuesta del biosensor en lo que se refiere a respuesta dinámica, sensibilidad, rango lineal y estabilidad. La respuesta obtenida para los diferentes electrodos se correlacionó con estudios de permeabilidad de oxalato [7] y mediciones de índice de hinchamiento en las diferentes matrices poliméricas. El biosensor con mejores propiedades analíticas resultó de inmovilizar oxalato oxidasa en una matriz mucina/quitosán de relación en peso 70/30 con glutaraldehído 5% v/v. Este electrodo enzimático mostró muy buena sensibilidad e intervalo lineal reteniendo un 75% de su actividad inicial después de 2 meses. Los resultados se compararon con los obtenidos anteriormente en nuestro laboratorio con matrices mucina /carbopol.