Determinación electroquímica y óptica de nitritos y nitratos en muestras de saliva

R. MORELATTO, A. AZCURRA, S. LÓPEZ DE BLANC, T. BENAVIDEZ, M. MORA, V. SOLÍS, A. BARUZZI

Merlo, San Luis, Argentina

Congreso; III CONGRESO ARGENTINO DE QUÍMICA ANALÍTICA; 2005

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

La determinación de nitritos y nitratos en fluidos biológicos es de suma importancia porque éstos pueden contribuír al proceso de carcinogénesis a través de la generación endógena de nitosaminas. La deterninación simultanea de ambos compuestos, de química muy compleja, es necesaria ya que según las condisiones del medio pueden interconvertirse en grado variable. La saliva es una matriz muy compleja que contiene numerosos metabolitos de naturaleza inorgánica, orgánica y biológica en concentraciones muy variadas. Estas caracteristicas propias de la saliva de cada individuo hacen que sea dificil controlar algunas variables por lo cual la estandarizaci{on de un método se hace complicado. Tal es el caso del pH debido a la gran variación en la capacidad buffer de las diferentes muestras. A todo esto debe sumarse las grandes variaciones inter e intraindividuales en la concentración de compuestos nitrogenados en saliva. Esto nos llevo a implementar en nuestro laboratorio un método electroquímico para el dosaje de nitritos además del clásico método óptico de Griess. Los objetivos del presente trabajo fueron encontrar las condisiones experimentales óptimas para dicha determinación, para la reducción de nitrato a nitrito y su posterior determinación como nitrito obteniendo resultados confiables por ambos métodos. El método electroquímico consiste en medir por cronoamperometría la corriente de reducción sobre carbono vitreo del producto de la reacción entre nitrito y trihidroxibenceno (1). En el intervalo de potencial estudiado (200 a -500 mV vs Ag/AgCl) se observó voltamétricamente un único proceso de reducción que no es afectado por la presencia de interferentes presentes en la saliva como el sulfocianuro, el más importante en determinaciones de rutina. Se utilizó el método de adición de estándares y se obtuvieron excelentes resultados con una muy baja dispersión tal como lo indica el análisis de regresión lineal. La concentración de nitrato se obruvo por diferencia luego de su reducción completa a nitrito y su posterior determinación con el método descrito anteriormente. Para ello se probaron diferentes reductores propuestos en bibliografía ( cobre, sulfato y V(III)) y Cd. Se encontró que los primeros tres reductores no pueden ser utilizados con muestra de saliva por presentar alguno de los siguientes inconvenientes: reacción con el compuesto nitrosado, reacción electroquímica en el intervalo de potencial analizado y/o reducción posterior del nitrato formado. El Cd fue el único que permitió la adecuada reducción cuantitativa de nitrato a nitrito sin problema de interferencia. En esta presentación se presentan los resultados de la calibración y la evaluación de las cifras de mérito del método electroquímico (sensibilidad analítica y de calibración, límite de detección y de cuantificación, intervalo lineal y dinámico) y se realiza un análisis comparativo con el método de Griess. Se valoraron soluciones de nitrato, nitrito, y sus mezclas en concentraciones similares a las presentes en saliva, obteniendose resultados similares y reproducibles por ambos métodos. Los valores obtenidos en saliva fueron reproducibles y estuvieron de acuerdo con lo informado en la literatura; se analizó la importancia de control de pH en una matriz de esta característica.