Influencia del número de microorganismos en la formación de biofilm de bacterias lácticas vaginales benéficas

MARIA CECILIA LECCESE TERRAF; JUAREZ TOMAS, MARIA SILVINA; MARIA C OTERO; MARIA ELENA FÁTIMA NADER; CLARA SILVA

Tafi del Valle

Jornada; XXVIII Reunion Anual Sociedad de Biologia de Tucuman; 2011

Las biopelículas con bacterias lácticas están presentes en los tractos gastrointestinal y genitourinario, y ejercerían un papel protector frente a la colonización de microorganismos patógenos. Biofilms se definen como sistemas biológicos con un alto nivel de organización, en los que los microorganismos forman una comunidad estructurada, coordinada y funcional, lo que favorece su permanencia en las superficies mucosas. En trabajos previos se determinó que Lactobacillus reuteri CRL1324, L. rhamnosus CRL1332 y L. delbrueckii CRL1510 forman biofilm en MRS caldo sin Tween 80 (MRS?T), mientras que L. gasseri CRL1263 no expresa esta propiedad. Los objetivos de este trabajo fueron estudiar el efecto del número de células viables de diferentes cepas de BLV (aisladas de vagina humana y seleccionadas por sus propiedades benéficas) en la formación de biofilm, y evaluar la estructura del biofilm formado. El biofilm se evaluó en MRS?T y LAPTg-T. Los inóculos se prepararon a partir de cultivos de 14 h (en medio de cultivo agotado o en solución fisiológica (SF), y ajustados a DO540nm de 0,6; 1 y 1,5). La formación de biofilm se cuantificó después de 72 h de incubación a 37ºC, por coloración con cristal violeta y DO570nm. La morfología de las biopelículas se monitoreó con microscopía de fluorescencia (tinción con naranja de acridina). L. rhamnosus CRL1332 formó biofilm en MRS-T y en LAPTg-T en las tres concentraciones de células inoculadas, mientras que L. reuteri CRL1324 (sólo con la mayor concentración celular) y L. delbrueckii CRL1510 (con los diferentes inóculos) formaron biofilm sólo en MRS-T. L. gasseri CRL1263 no formó biofilm en ninguna de las condiciones ensayadas. La resuspensión de microorganismos en medio de cultivo o en SF no modificó la formación de biofilm. La microscopía de fluorescencia evidencia que sólo L. rhamnosus CRL1332 y L. reuteri CRL1324 formaron una estructura homogénea con una matriz asociada, que se tiñe con el colorante. Cada uno de los microorganismos en estudio requiere diferentes condiciones óptimas para formar biofilm. Los resultados obtenidos llevan a que se profundice en la caracterización de la naturaleza química de la matriz del biofilm.