Calcitriol regula la actividad del intercambiador Na/Ca (NCX) en células intestinales

PICOTTO G., CENTENO V., PÉREZ A., TOLOSA DE TALAMONI N.

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2008

El calcitriol regula la función de los enterocitos modulando la expresión génica e induciendo efectos no genómicos, lo que afecta el transporte transcelular de calcio. La salida del catión hacia la lámina propia, se efectúa por la Ca2+-ATPasa y el intercambiador Na+/Ca2+ (NCX1). El objetivo del presente trabajo fue estudiar los mecanismos de modulación del calcitriol sobre el NCX1 de células intestinales. Para ello, se aislaron enterocitos de pollos controles y raquíticos; estos últimos se trataron con calcitriol y/o vehículo. Se midió la actividad NCX1 trabajando en modo reverso. Los cambios en los niveles de ARNm para el NCX1 se midieron por RT-PCR y por western-blot la expresión de NCX1 y de VDR. La actividad basal del NCX1 resultó menor en los enterocitos de animales raquíticos en comparación con los controles. La administración crónica de vitamina D o de calcitriol incrementó la actividad NCX1. La exposición directa a calcitriol de las células intestinales aumentó la actividad del intercambiador, efecto bloqueado por el tratamiento previo con cicloheximida (CHX). La administración intraperitoneal de calcitriol incrementó los niveles de ARNm, lo que no fue revertido completamente por el tratamiento con CHX. El calcitriol incrementó la expresión de NCX1, efecto bloqueado por CHX. La expresión del VDR no se modificó por el secoesteroide. El tratamiento de las células con calcitriol (10-8M) y con forskolina (10 µM) por tiempos cortos resultó en una rápida inducción de la actividad NCX1. Tanto el inhibidor específico de la proteína quinasa A (PKA), Rp-cAMPS (150 µM), como el inhibidor de la proteína quinasa C (PKC), staurosporina (10-8M), bloquearon el efecto del calcitriol sobre la activación rápida de NCX1. Los resultados sugieren que el calcitriol induce la actividad del NCX1 de intestino por un mecanismo rápido, que involucra las vías de PKA y PKC, y estimula la transcripción del gen NCX1 y de su producto, sin alterar los niveles intracelulares de VDR.