ACCIÓN CONJUNTA DE MENADIONA Y 1,25(OH)2D3 EN LA REDUCCIÓN DE LA PROLIFERACIÓN CELULAR DE CÉLULAS DE CÁNCER DE MAMA

PICOTTO GABRIELA1, MARCHIONATTI ANA M1, NARVÁEZ CARMEN2, WELSH JOELLEN2, TOLOSA DE TALAMONI NORI1

Rosario

Congreso; XXIII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral; 2006

El 1,25(OH)2D3 o calcitriol es un regulador negativo del crecimiento de las células tumorales de mama tanto in vitro como in vivo. Se ha demostrado que la inhibición del crecimiento tumoral en respuesta al 1,25(OH)2D3 se debe a la activación de la apoptosis. Uno de los mecanismos por el cual el esteroide induce apoptosis en células MCF-7 es mediante alteración de la función mitocondrial, efecto que no es bloqueado con inhibidores de caspasas. En células resistentes a la  vitamina D (MCF7DR), en cambio, los efectos mencionados no se producen. Por otra parte, se conoce que los compuestos que disminuyen los niveles  de glutatión (GSH) intracelular, pueden potenciar la acción de las drogas antitumorales en ciertos tipos de cáncer. La menadiona (MEN), mediante su ciclo redox metabólico, consume GSH, generando en consecuencia incremento en la producción de especies reactivas derivadas del oxígeno (ROS). El objetivo de este trabajo fue conocer si MEN potencia la respuesta apoptótica inducida por calcitriol en las células tumorales de mama y los mecanismos moleculares involucrados en tal respuesta. Para ello, se emplearon células MCF-7 y MCF-7DR las cuales se cultivaron en DMEM (5% FBS) y se trataron con calcitriol (100 nM), MEN (5 mM), calcitriol + MEN o vehículo (etanol < 0.1%) durante 96 horas. La proliferación celular se determinó por la técnica de violeta de cristal, la producción de ROS por citometría de flujo, la actividad de las enzimas superóxido dismutasa (SOD), glutatión peroxidasa (GPx) y los niveles de GSH, por espectrofotometría. Los resultados muestran que tanto MEN como calcitriol inhiben el crecimiento de las células MCF-7, siendo este efecto mayor cuando ambas drogas se administran en forma conjunta. Como era esperable, el crecimiento celular de las MCF-7DR no respondió al 1,25(OH)2D3, pero fue sensible al tratamiento combinado. La producción de ROS en las células MCF-7 aumentó ligeramente por el tratamiento con 1,25(OH)2D3, lo cual se incrementó más aún con el tratamiento conjunto, mientras que en las células MCF7DR, la producción de ROS no se modificó. Las actividades de las enzimas del sistema antioxidante, tales  como SOD y GPx, aumentaron con los distintos tratamientos, observándose un acentuado efecto, especialmente sobre GPx, cuando ambas drogas se añadieron simultáneamente al medio de incubación. Los niveles de GSH  disminuyeron alrededor del 40% luego del tratamiento con MEN, calcitriol o MEN+calcitriol. En conclusión, MEN potencia el efecto inhibitorio de calcitriol  sobre el crecimiento de las células MCF-7 debido a que genera depleción del GSH intracelular que lleva a la producción de ROS, produciéndose el consiguiente estrés oxidativo y el desencadenamiento del incremento de las enzimas involucradas en las defensas antioxidantes como probable mecanismo compensatorio.