Participación del sistema proteolítico mediado por la ubicuitina en la via de señalización inducida por ceramida en cultivos primarios de astrocitos.

CECILIA CALATAYUD*; LAURA A. PASQUINI*; JUANA M. PASQUINI; EDUARDO F. SOTO.

Vaquerias, Córdoba.Argentina

Congreso; VII Taller de Neurociencias; 2005

Taller de Neurociencias

La degradación selectiva de proteínas anormales o de vida media corta en las células eucariotas procede a través del sistema proteolítico dependiente de ubicuitina (Ub). Las señales que marcan a las proteínas para su ubicuitinización se han estudiado recientemente en forma exhaustiva. En este trabajo, nuestro objetivo fue investigar la relación entre la acción de la ceramida y la activación del sistema dependiente de Ub en cultivos primarios de astrocitos. También fueron estudiados los cambios en la expresión y en los mensajeros de los componentes de esta vía,  los cuales son sustratos bien conocidos del camino mediado por Ub y que participan en la regulación del proceso de muerte celular. El agregado de diferentes concentraciones de ceramida a cultivos de astrocitos produjo un aumento en la expresión del gen de la  Ub y del gen que codifica para una de las enzimas de la vía de la Ub, la E1, sin ningún cambio en la viabilidad celular. Los estudios inmunocitoquímicos mostraron un aumento en la expresión de bcl-2, una disminución en IkB y su forma fosforilada, además de una translocación al núcleo de NFkB y un incremento en la unión de este último a su secuencia consenso. Este último resultado se obtuvo a una hora de tratamiento con ceramida. Todos estos componentes parecen actuar como posibles moduladores de la respuesta a ceramida de los astrocitos. Nuestros resultados parecen indicar que en cultivos primarios de astrocitos, la ceramida, a las concentraciones usadas en este estudio, no produce apoptosis. Sin embargo, induciría  una activación del camino proteolítico dependiente de la Ub, probablemente como una consecuencia de una activación de fosfatasas y kinasas, o a través de la generación de especies reactivas del oxígeno (ROS), las cuales actuarían disparando señales de la vía dependiente de la Ub y todo esto conduciría a un rol principal de NFK-B como antiapoptótico.