CUANTIFICACIÓN DE LA INMUNOREACTIVIDAD EN LA SUSTANCIA NIGRA DE RATAS. ¿QUE MÉTODOS PODEMOS USAR?

CAMBIAGGI V; MOREL GR; PIOVE ML; JEANNERET L; GOYA RG; ZUCCOLILLI GO

La Plata

Congreso; XII CONGRESO DE CIENCIAS MORFOLÓGICAS Y 9 JORNADAS DE EDUCACIÓN; 2010

Facultad de Ciencias Veterinarias, UNLP

El conteo de elementos celulares (células, núcleos u organelas) en secciones de tejidos es un tema de permanente controversia. A lo largo del tiempo se han aplicado distintos métodos para estimar el número de elementos de interés siempre partiendo de un muestreo sistemático de las secciones obtenidas. La fiabilidad de los métodos para estimar el número total de células es relevante para realizar comparaciones en los diferentes diseños experimentales. La sustancia nigra, en particular. ha sido y sigue siendo un área de gran interés por su relación con algunas enfermedades neurodegenerativas (Parkinson y Huntington). En el presente trabajo se cuantificaron las neuronas dopaminérgicas de la sustancia nigra marcadas con inmunohistoquímica para la enzima tirosina hidroxilasa en ratas adultas (6 meses) y seniles (30 meses). Sobre una serie de secciones de 30 µm de espesor. no contiguas y muestreadas en forma sistemática se aplicaron diferentes métodos usualmente utilizados para cuantificar neuronas (conteo manual, conteo digital, método del disector óptico, método de Konigsmark modificado, medición de la densidad óptica media y área inmunoreactiva). Las imágenes obtenidas se procesaron con distintos softwares comerciales (NIH Image 1.62, ImagePro Plus v5.1 y Adobe Photoshop CS2). El análisis estadístico realizado reveló que en general, todos los métodos permiten observar las diferencias estadísticas que aparecen entre ambos grupos de ratas. Sin embargo, la sustancia nigra es un núcleo con poblaciones neuronales heterogéneas y por lo tanto, la estimación del número total de neuronas por el método de Konigsmark con la corrección de Abercrombie resultó el más apropiado.