Actividad antifúngica de ftalocianinas de zinc(II) sustituidas en posiciones no periféricas

CUESTAS ML; LUQUEZ LM; GAUNA GA; TOSCANINI MA; GARCÍA VIOR MC

Congreso; IV Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos (IV GRAFOB).; 2018

La terapia fotodinámica antimicrobiana (APDT) es una metodología que se fundamenta en la acumulación preferencial de un fotosensibilizador (Ps) en los microorganismos, seguido por una irradiación del área afectada con una luz, que en presencia de oxígeno, desencadena la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS) que conducirán a la muerte microbiana [1]. La ventaja de la APDT como método para inactivar microorganismos patógenos es que debido a que los radicales libres son las especies que median la inactivación celular, es altamente improbable que los microorganismos desarrollen una resistencia a la acción fotodinámica. El éxito del tratamiento depende del comportamiento del Ps lo que incluye su selectividad tumoral y la eficiencia de generar ROS, por lo que la optimización de las características fotofísicas y fotobiológicas es esencial para determinar la eficacia del Ps [2]. El diseño de metaloftalocianinas cargadas positivamente ha presentado un especial interés debido a que se demostró que poseen afinidad por sitios celulares vulnerables implicados en la fotoinactividad bacteriana y a su vez, facilitan la solubilidad en medios acuosos. Por otro, la sustitución en posiciones no periféricas con sustituyentes dadores de electrones, así como el reemplazo isostérico de oxígeno por azufre, confiere desplazamientos batocrómicos significativos, mejorando de esa manera la eficiencia fotodinámica. De acuerdo a ello en nuestro laboratorio hemos sintetizado tres ftalocianinas de zinc(II) catiónicas sustituidas en posiciones no periféricas; tetraioduro de 1,8(11),15(18),22(25)-tetrakis[(2-N,N,N-trimetil-amonio)etilsulfanil]ftalocianinato de zinc(II) (Pc1), tetraioduro de 1,8(11),15(18),22(25)-tetrakis[(2-N,N,N-trimetil-amonio)etoxil]ftalocianinato de zinc(II) (Pc2), y tetraioduro de 1,8(11),15(18),22(25)-tetrakis[(3-N,N,N-trimetil-amonio)fenoxil]ftalocianinato de zinc(II) (Pc3) con la finalidad de evaluar la potencial actividad antifúngica frente a Candida albicans ATCC 90029, Candida parapsilosis ATCC 22019 y Aspergillus flavus ATCC 073167 mediante inactivación fotodinámica con luz solar y artificial.Se determinó la concentración mínima inhibitoria (CIM) mediante el método de microdilución en caldo. Se incubaron suspensiones fúngicas a diferentes concentraciones de PS para obtener la concentración de fármaco final requerida y la densidad de inóculos (inóculos finales = 0,5-2,5 x 105 CFU / ml). Luego, las placas de microdilución se incubaron en la oscuridad durante 3 horas a 37 ° C. Los cultivos se expusieron a la luz a diferentes tiempos (5 min, 15 min y 30 min). Se empleó como fuente de luz, luz solar y luz artificial (15 mW / cm-2). Los cultivos fúngicos luego se incubaron en la oscuridad durante 24-48 horas a 37 ° C. Se prepararon controles de crecimiento fúngico (sin droga) y de esterilidad del medio por placa. Los experimentos de control se llevaron a cabo con PS en presencia y ausencia de luz. Todos los experimentos fueron realizados por triplicado.Las actividades fungistáticas o fungicidas se determinaron separando cada muestra en una placa de agar Sabouraud y cultivando las muestras 24-48 horas a 37 ° C.