Genotipifiación por RFLP del virus de la Hepatitis B (HBV): un aporte a su actualización.

MATHET VL, CUESTAS ML, FLEMING X, MINASSIAN ML, RIVERO C, RUIZ V, SÁNCHEZ DO, OUBIÑA JR

Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina

Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005

  OBJETIVO: Caracterizar parcialmente el genoma de una cepa local de HBV asociada a un perfil de restricción no reconocido previamente, luego del análisis por RFLP de productos de amplificación del gen S. PACIENTE, MATERIALES Y METODOS: Paciente adulto con hepatitis crónica leve. Sus marcadores serológicos fueron: HBsAg [+], HBeAg [-], anticuerpos IgG anti-HBc [+], anticuerpos anti-HBe [+] y anticuerpos anti-HBs [-].Se investigó el DNA viral mediante PCR para el gen S, caracterizándose inicialmente por RFLP según el método de Lindh y col. Los productos de amplificación fueron también clonados en el vector pGEM-T Easy. Se analizó la secuencia nucleotídica de 3 clones y del producto de PCR. El genotipo viral fue determinado mediante análisis filogenético de las secuencias obtenidas. RESULTADOS: Las secuencias nucleotídicas de los 3 clones y la del producto de PCR del gen S se agruparon con las del genotipo F, siendo 84 su valor de bootstrap. Se observó la pérdida de un sitio de clivaje para la endonucleasa Tsp509I, reconociéndose sólo dos en las posiciones 42 y 421. CONCLUSIONES: Se describe la circulación en Argentina de una cepa de HBV del genotipo F que exhibe un nuevo perfil de restricción respecto a los descriptos en el método de Lindh y col., el que deberá ser incorporado a los existentes para dicho genotipo.   OBJETIVO: Caracterizar parcialmente el genoma de una cepa local de HBV asociada a un perfil de restricción no reconocido previamente, luego del análisis por RFLP de productos de amplificación del gen S. PACIENTE, MATERIALES Y METODOS: Paciente adulto con hepatitis crónica leve. Sus marcadores serológicos fueron: HBsAg [+], HBeAg [-], anticuerpos IgG anti-HBc [+], anticuerpos anti-HBe [+] y anticuerpos anti-HBs [-].Se investigó el DNA viral mediante PCR para el gen S, caracterizándose inicialmente por RFLP según el método de Lindh y col. Los productos de amplificación fueron también clonados en el vector pGEM-T Easy. Se analizó la secuencia nucleotídica de 3 clones y del producto de PCR. El genotipo viral fue determinado mediante análisis filogenético de las secuencias obtenidas. RESULTADOS: Las secuencias nucleotídicas de los 3 clones y la del producto de PCR del gen S se agruparon con las del genotipo F, siendo 84 su valor de bootstrap. Se observó la pérdida de un sitio de clivaje para la endonucleasa Tsp509I, reconociéndose sólo dos en las posiciones 42 y 421. CONCLUSIONES: Se describe la circulación en Argentina de una cepa de HBV del genotipo F que exhibe un nuevo perfil de restricción respecto a los descriptos en el método de Lindh y col., el que deberá ser incorporado a los existentes para dicho genotipo.