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INTRODUCCIÓN: La infección oculta por HBV se caracteriza por la detección de ADN viral en suero o hígado de individuos en quienes no se detecta HBsAg más allá del período de ventana de la infección, con o sin marcadores serológicos de infección previa. En la ciudad de Buenos Aires y alrededores, un estudio previo reportó una prevalencia de infección oculta por HBV del 7,7 % entre usuarios de drogas inyectables, desconociéndose aún dicha tasa entre hemodonantes (Trinks y cols., J. Viral Hepatitis, 2008).OBJETIVO: Documentar la eventual presencia de ADN del HBV en donantes con niveles detectables de Igs totales anti-HBc , como único marcador de infección.INDIVIDUOS, MATERIALES Y MÉTODOS: Se recolectó el suero de 110 muestras de sangre de dadores que concurrieron al servicio de Hemoterapia del Hospital de Clínicas José de San Martín entre Mayo de 2006 y Marzo de 2008 que exhibían positividad para Igs totales anti-HBc y resultados negativos para HBsAg, anticuerpos anti-HCV y anti-HIV.Cada una de las muestras fue procesada individualmente mediante un triple test de amplificación de ácidos nucleicos para la detección cualitativa y simultánea en suero o plasma humano, del RNA del HIV-1, el RNA del HCV y el DNA del HBV (PROCLEIX-ULTRIO) según las instrucciones del fabricante. Las muestras con resultados reactivos en el Ensayo Ultrio, fueron analizadas individualmente con el Procleix Ultrio® HBV Discriminatory Assay (Ensayo Discriminatorio) para determinar si eran reactivas para HBV. A su vez, en aquellas muestras positivas, se procedió a la extracción de ADN mediante lisis alcalina.Se realizaron también varios ensayos no comerciales de amplificación utilizando diferentes pares de cebadores específicos para todas las regiones genómicas del HBV (PCR para gen S, y PCRs anidadas para una región parcialmente yuxtapuesta a la anterior, región pre-core/core y para el genoma completo).Los productos amplificados fueron visualizados en geles de agarosa al 1%, teñidos con bromuro de etidio, y purificados para su posterior secuenciación nucleotídica (Big-Dye Termination chemistry Applied Biosystems, USA ). RESULTADOS: Tres de las 110 muestras séricas analizadas (2,7%) fueron positivas para el triple test PROCLEIX-ULTRIO. Sin embargo, sólo dos de ellas exhibieron reactividad en el ensayo discriminatorio indicando la presencia de ADN del HBV (1,8%). El ADN de estas dos muestras (extraído en paralelo) fue también amplificado mediante PCR anidada, observándose bandas del tamaño esperado para las regiones genómicas del HBV comprendidas entre las posiciones 1736 a 2471.El análisis filogenético de la secuencia nucleotídica de la región Pre-core/core de una de las muestras reveló que ésta pertenece al genotipo E, oriundo de África y excepcional en América. Se encuentra en procesamiento la caracterización genómica de la segunda muestra positiva en el test discriminatorio para HBV. CONCLUSIONES: 1. Se documentó la presencia de infección oculta por HBV entre hemodonantes con anticuerpos anti-HBc (1,8% de la población estudiada). 2. Dado que i) el genotipo E exhibe la mayor divergencia aminoacídica entre los genotipos del HBV a nivel del determinante a del HBsAg, -lo cual puede afectar su detección mediante equipos comerciales que utilizan anticuerpos monoclonales- ; y ii) la sensibilidad de la metodología empleada para detectar genomas virales es superior a la del enzimoinmunoensayo para pesquisar el HBsAg, este estudio muestra la ventaja de realizar el tamizaje de las unidades de sangre a transfundir mediante la tecnología NAT (Nucleic acid Amplification Testing) para minimizar el riesgo la transmisión de HBV por esta vía.

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