Estudio de la regulación de la expresión del transportador MRP4 por la proteína X del virus hepatitis B: Implicancias en la resistencia a la terapéutica antiviral

CASTILLO, AI; CUESTAS, ML; GENTILE, EA; DELFINO, CM; CASTRONUOVO, CC; ANDREETTA, AM; OUBIÑA, JR; MATHET, VL

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

INTRODUCCIÓN: Al igual que otros virus humanos oncogénicos, HBV codifica una pequeña proteína regulatoria que puede estimular eficientemente la transcripción y replicación viral: la proteína HBx. Aunque no se une al DNA, la primera actividad identificada en esta proteína fue la capacidad de activar la transcripción de genes virales y celulares. HBx es un polipéptido no estructural de 154 aminoácidos, el cual está involucrado en la infección, replicación, patogenia y desarrollo de hepatocarcinoma celular. Además de su capacidad de transactivar genes críticos o importantes en la proliferación celular, progreso del ciclo celular, estabilidad genética y apoptosis, se ha reportado que HBx es capaz de transactivar algunos de los genes que codifican para proteínas celulares de la familia de transportadores transmembrana ABC, alterando la sensibilidad a distintas drogas en las células infectadas. Por otro lado, diversos autores han documentado que las mutantes K130M y V131I exhiben una actividad transactivadora mayor que la proteína X wild type.La Superfamilia de las ABC (ATP Binding Cassette transporters) es la familia de proteínas de transporte más amplia y diversa entre las conocidas hasta el presente. MRP4/ ABCC4 (Multidrug Resistance Protein 4) es la proteína más pequeña de la subfamilia ABCC. Una característica única de esta proteína es su notable capacidad de transportar ciertas moléculas endógenas que tienen un rol clave en la comunicación y señalización celular, incluyendo nucleótidos cíclicos (AMPc y GMPc), ADP, eicosanoides, uratos, hormonas esteroideas, folatos, ácidos biliares y glutatión. Como transportador de drogas, MRP4 sobresale por su particularmente amplia especificidad de sustrato, que abarca desde antivirales (adefovir, tenofovir, ganciclovir) y antibióticos (cefalosporinas) hasta agentes cardiovasculares y antineoplásicos. Se expresa principalmente en próstata, hepatocitos, barrera hematoencefálica, eritrocitos y plaquetas.OBJETIVO: Estudiar el efecto de HBx wt y HBx mutante (K130M y V131I) sobre los niveles de expresión del mRNA de MRP4.METODOLOGÍA: Se clonaron los genes HBx wt y HBx mutante en plásmidos de expresión. Dichos plásmidos fueron posteriormente empleados para transfectar transitoriamente células Huh7 por 24 y 72 h, en las cuales se midió la expresión del mRNA de MRP4 mediante qPCR.RESULTADOS: Tanto para HBx wt como para HBx mutante se evidenció un efecto activador de la expresión de MRP4.CONCLUSIONES: La sobreexpresión de MRP4 por acción de la proteína X del HBV –tanto wild type como mutada- favorecería el desarrollo de resistencia a los fármacos antivirales que se utilizan actualmente en el tratamiento de la hepatitis B crónica.