Efecto de la proteína X del virus hepatitis B (HBV) sobre la proteína BCRP de la superfamilia de transportadores ABC.

CASTILLO, AI; CUESTAS, ML; GENTILE, EA; DELFINO, CM; OUBIÑA, JR; MATHET, VL.

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

La proteína X del HBV (HBx) desempeña un rol importante en la oncogénesis hepática. Las mutantes K130M y V131I (HBxmt) exhiben una actividad transactivadora mayor que la proteína wild type (HBxwt) sobre genes celulares, lo que produce un aumento en su contribución a la hepatocarcinogénesis. Las ABC son bombas transmembrana activas que transportan sustratos en contra del gradiente de concentración, utilizando la hidrólisis de ATP como fuente de energía. La proteína BCRP se encuentra implicada en la homeostasis celular de fosfolípidos y colesterol. Su sobreexpresión está asociada a la resistencia a múltiples drogas. Objetivo: Analizar el efecto de la expresión de las proteínas HBxwt y HBxmt sobre los niveles de ARNm y sobre los niveles de expresión de la proteína BCRP. Metodología: Se transfectaron transitoriamente células HeLa y Huh7 con plásmidos que contienen la secuencia de HBxwt o HBxmt. A las 24h se evaluó mediante Real time PCR la variación en la cantidad relativa de ARNm de BCRP. La detección de la expresión de dicha proteína se realizó mediante Western blot. Resultados: En células HeLa se evidenció un incremento en la expresión de bcrp debido a la expresión de HBxmt. No se observó una variación estadísticamente significativa en la expresión de dicho gen cuando los cultivos celulares expresaban HBxwt al compararse con las células control. En contraposición, en células Huh7 se detectó un incremento en la expresión de bcrp debido a la expresión de HBxwt, mientras que esto no se evidenció con la mutante. Conclusiones: Al estudiar el efecto de las proteínas HBxwt y HBxmt sobre los niveles de ARNm correspondientes al gen bcrp, se observó un comportamiento dependiente de la naturaleza salvaje o mutante de dicha proteína viral. El incremento de la expresión de BCRP por HBx podría estar asociado a la resistencia a múltiples drogas antitumorales y antivirales, produciendo eventuales fallas en el tratamiento de la Hepatitis B en los pacientes crónicamente infectados.